Visualizar os componentes celulares do sistema nervoso requer colorações especializadas que destacam bainhas de mielina, processos neuronais e células gliais. Essas técnicas são essenciais para diagnosticar doenças desmielinizantes, distúrbios neurodegenerativos e tumores cerebrais.
Colorações de Mielina
Luxol Fast Blue (LFB) é a coloração histoquímica padrão para mielina. O corante ftalocianina de cobre liga-se ao componente proteico básico das bainhas de mielina, produzindo uma cor azul-esverdeada. A LFB é usada para avaliar padrões de mielinização (normal vs. hipomielinização em leucodistrofias), desmielinização (placas de esclerose múltipla — áreas bem demarcadas de perda de mielina com preservação axonal relativa) e patologia da substância branca (edema, infarto, leucoencefalopatia). A LFB é tipicamente combinada com H&E ou PAS para detalhe celular.
Cianina solocromo é uma coloração rápida de mielina que produz coloração azul-preta da mielina em 10-15 minutos. É usada para seções congeladas e avaliação rápida da mielinização.
IHQ para proteína básica da mielina (MBP) detecta o componente MBP das bainhas de mielina. A IHQ para MBP é mais sensível que a LFB para detectar desmielinização precoce e debris de mielina residual. É usada para confirmar desmielinização em biópsias de esclerose múltipla e identificar mielina central em tumores da bainha nervosa.
Colorações Neuronais
Violeta de Cresila (CV) — uma coloração de Nissl que se liga ao RNA ribossômico no citoplasma neuronal, produzindo substância de Nissl violeta. A CV demonstra densidade neuronal, padrão de Nissl (perda da substância de Nissl — cromatólise — indica lesão axonal) e morfologia nuclear. A combinação clássica LFB-CV cora mielina (azul) e neurônios (violeta) na mesma seção.
Impregnação por prata de Bielschowsky — um método de prata por redução que cora neurofibrilas (intracelulares) e processos neuríticos (axônios e dendritos) em preto contra um fundo marrom pálido. Demonstra novelos neurofibrilares (novelos intracelulares em forma de chama na doença de Alzheimer), placas neuríticas (depósitos extracelulares de amiloide com neuritos distróficos), corpos de Pick (inclusões intracitoplasmáticas redondas na doença de Pick) e fios do neurópilo (neuritos distróficos no neurópilo).
IHQ para NeuN (Núcleos Neuronais) — um marcador específico de neurônios maduros. NeuN é uma proteína nuclear expressa na maioria dos tipos neuronais (exceções incluem células de Purkinje cerebelares, fotorreceptores da retina e neurônios olivares inferiores). A perda da coloração de NeuN indica lesão ou morte neuronal.
IHQ para neurofilamento (NF) — detecta o citoesqueleto axonal. As colorações de neurofilamento demonstram esferoides axonais (axônios inchados, NF-positivos em lesão axonal) e torpedos (axônios de células de Purkinje inchados em degeneração cerebelar). NF também é usado para avaliar densidade axonal em biópsias de nervo periférico.
Colorações Gliais
IHQ para GFAP (proteína ácida fibrilar glial) é o marcador definidor de astrócitos. No cérebro normal, a GFAP cora astrócitos protoplasmáticos e fibrosos com processos finos e ramificados. Na astrogliose reativa (resposta a qualquer lesão do SNC), a regulação positiva da GFAP produz hipertrofia dos corpos celulares e processos — astrócitos “gemistocíticos”. A GFAP é também o marcador de linhagem para tumores astrocíticos (astrocitoma, glioblastoma, xantoastrocitoma pleomórfico).
IHQ para Olig2 — marcador nuclear de oligodendrócitos e seus precursores. Olig2 é expresso em oligodendrogliomas e é um marcador sensível para neoplasias gliais. Também é expresso em um subconjunto de tumores parenquimatosos pineais.
IHQ para Iba1 (molécula adaptadora 1 ligante de cálcio ionizado) — um marcador específico de micróglia que cora tanto micróglia em repouso (ramificada) quanto ativada (ameboide). A micróglia ativada é regulada positivamente em doenças neurodegenerativas (Alzheimer, Parkinson, ELA), esclerose múltipla e infecção. CD68 — um marcador lisossomal em macrófagos e micróglia ativada, usado para avaliar o grau de infiltrado inflamatório.
Aplicações em Doença Desmielinizante
Esclerose múltipla — LFB demonstra placas desmielinizantes perivenulares bem demarcadas na substância branca. IHQ para neurofilamento mostra preservação axonal relativa dentro da placa. IHQ para MBP confirma perda de mielina. IHQ para CD68 destaca infiltração macrofágica/microglial. IHQ para GFAP mostra astrogliose reativa na borda da placa.
Leucoencefalopatia multifocal progressiva (LMP) — infecção por vírus JC de oligodendrócitos causa desmielinização irregular com núcleos oligodendrogliais aumentados e infectados viralmente. LFB mostra perda de mielina; IHQ para SV40 (reage cruzadamente com vírus JC) confirma o diagnóstico.
Leucodistrofias — erros inatos do metabolismo da mielina (leucodistrofia metacromática, adrenoleucodistrofia, doença de Krabbe) mostram perda difusa de mielina na LFB com material de armazenamento específico identificado por colorações especiais. A garantia de qualidade para colorações neuropatológicas inclui controles positivos conhecidos (cérebro com patologia de Alzheimer para Bielschowsky, placa de esclerose múltipla para LFB).
