As colorações de tecido conjuntivo são um grupo de técnicas histoquímicas que distinguem os principais componentes da matriz extracelular — colágeno, fibras elásticas, reticulina e membrana basal — uns dos outros e das células musculares. São essenciais para avaliar fibrose, patologia vascular e reações estromais.
Tricrômio de Masson
O tricrômio de Masson usa três corantes para colorir diferentes componentes teciduais. Hematoxilina férrica de Weigert cora núcleos em preto. Um corante ácido (escarlate de Biebrich-fucsina ácida) cora músculo e citoplasma em vermelho. Um corante aniônico (azul de anilina ou azul de metila) cora colágeno em azul (ou verde, com verde claro SF como terceiro corante). A diferenciação em ácido fosfotúngstico ou fosfomolíbdico controla quanto corante vermelho é retido — o músculo permanece vermelho, enquanto o colágeno é descorado e capta o contracorante azul.
As aplicações incluem avaliar fibrose hepática (estágio METAVIR, escore Ishak), fibrose miocárdica após infarto, doença muscular (distrofias mostram colágeno endomisial aumentado) e fibrose renal (fibrose intersticial e atrofia tubular). A coloração também destaca membranas basais glomerulares e ajuda a identificar necrose fibrinóide em vasos.
Verhoeff-van Gieson (VVG)
VVG cora fibras elásticas em preto usando a coloração elástica de Verhoeff (hematoxilina, cloreto férrico e iodo), seguida pelo contracorante van Gieson (fucsina ácida e ácido pícrico) que cora colágeno em vermelho e músculo em amarelo. Fibras elásticas aparecem como fibras pretas, onduladas e ramificadas contra um fundo vermelho-amarelo. A VVG é usada para avaliar distúrbios das fibras elásticas: síndrome de Marfan (fragmentação e disrupção das fibras elásticas aórticas), enfisema (perda de fibras elásticas alveolares) e arteriosclerose (duplicação e calcificação da lâmina elástica). Em patologia vascular, a VVG demonstra as lâminas elásticas interna e externa, essenciais para identificar invasão vascular por tumores e classificar lesões arteriais.
Coloração de Reticulina
As colorações de reticulina (impregnação por prata de Gordon e Sweet ou Gomori) depositam prata metálica nas fibras de reticulina (colágeno tipo III), que aparecem em preto contra um fundo pálido. A reticulina forma o arcabouço de sustentação de glândulas, vasos sanguíneos e músculo liso. Em patologia hepática, as colorações de reticulina destacam a arquitetura das placas hepáticas — a perda do arcabouço normal de reticulina indica cirrose; a expansão entre as placas indica nódulos regenerativos. Em patologia da medula óssea, a coloração de reticulina gradua a mielofibrose (MF-0 a MF-3). Em patologia tumoral, a reticulina delineia estruturas alveolares e glandulares, ajudando a classificar tumores pouco diferenciados.
Hematoxilina por Ácido Fosfotúngstico (PTAH)
A PTAH cora fibrina, estriações cruzadas do músculo estriado, fibras gliais e núcleos. Estriações musculares e fibrina aparecem em azul; colágeno e cartilagem aparecem em marrom-rosado. A PTAH é usada para diagnosticar necrose fibrinóide (vasculite), rabdomiossarcoma (estriações cruzadas) e doença de Alzheimer (novelos neurofibrilares e placas senis). A coloração requer oxidação cuidadosa (permanganato de potássio) e mordentação e é tecnicamente exigente.
Imuno-histoquímica para Actina de Músculo Liso
Embora não seja uma coloração histoquímica, a IHQ para actina de músculo liso (SMA) substituiu amplamente as colorações tradicionais de tecido conjuntivo para identificar células musculares lisas e miofibroblastos. A SMA cora músculo liso vascular, pericitos e células mioepiteliais. É usada para avaliar diferenciação tumoral (leiomiossarcoma) e proliferações miofibroblásticas.
Controle de Qualidade
Cada coloração de tecido conjuntivo requer um controle positivo conhecido por conter o componente alvo: pele ou cólon para tricrômio (colágeno), artéria ou pulmão para VVG (fibras elásticas), fígado ou baço para reticulina e músculo ou coágulo de fibrina para PTAH. Os controles são processados com cada lote. Supercoloração e subcoloração são avaliadas comparando a intensidade do controle com normas estabelecidas. A solução de problemas comuns inclui ajustar o tempo de diferenciação (tricrômio), concentração de cloreto férrico (VVG) ou temperatura da solução de prata (reticulina).
