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Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

Em resumo, a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica laboratorial usada para fazer milhões de cópias de um segmento específico de DNA. Os cientistas frequentemente precisam estudar o DNA, mas amostras biológicas (como uma gota de sangue ou um swab da bochecha) geralmente contêm uma quantidade muito pequena de material genético — muito pouco para ver ou analisar diretamente. A PCR resolve este problema de “agulha no palheiro” amplificando o DNA até que haja uma quantidade grande o suficiente para trabalhar.

Como Funciona a PCR: O Ciclo de Três Etapas

Diagrama mostrando as três etapas de um ciclo de PCR: Desnaturação, Anelamento e Extensão.

A PCR não requer maquinário complexo para “cortar e colar” DNA; em vez disso, usa mudanças de temperatura para controlar a reação. O processo ocorre dentro de um termociclador e se repete aproximadamente 25 a 40 vezes.

  1. Desnaturação (O “Abrir”)

A mistura da reação é aquecida a aproximadamente 95°C. Nesta alta temperatura, as ligações de hidrogênio que mantêm as duas fitas da dupla hélice do DNA juntas se quebram, fazendo com que o DNA se separe em duas fitas simples.

  1. Anelamento (O “Iniciar”)

A temperatura é reduzida para entre 50°C e 65°C. Isso permite que pequenos fragmentos de DNA feitos sob medida chamados primers se liguem (anellem) às sequências alvo específicas no DNA de fita simples. Estes primers atuam como “marcadores”, dizendo à enzima exatamente onde começar a copiar.

  1. Extensão (O “Construir”)

A temperatura é elevada para cerca de 72°C. Uma enzima chamada Taq polimerase (uma DNA polimerase resistente ao calor) agarra-se aos primers e começa a adicionar nucleotídeos à fita. Ela constrói uma nova fita complementar de DNA, efetivamente dobrando a quantidade de DNA alvo.