简而言之,聚合酶链式反应 (PCR) 是一种实验室技术,用于扩增特定 DNA 片段的数百万个拷贝。科学家经常需要研究DNA,但生物样本(例如一滴血或口腔拭子)通常只含有极少量的遗传物质——少到无法直接观察或分析。PCR技术通过扩增DNA,直至获得足够数量的DNA,从而解决了这个“大海捞针”的难题。
PCR的工作原理:三步循环
PCR不需要复杂的仪器来“切割和粘贴”DNA;相反,它利用温度变化来控制反应。该过程在PCR仪中进行,大约重复25到40次。
- 变性(“解旋”)
反应混合物被加热到约95°C。在这个高温下,连接DNA双螺旋两条链的氢键断裂,导致DNA分离成两条单链。
- 退火(“引物”)
温度降至 50°C 至 65°C 之间。这使得被称为引物的短链定制 DNA 能够与单链 DNA 上的特定靶序列结合(退火)。这些引物就像“书签”一样,告诉酶从哪里开始复制。
- 延伸(“构建”)
温度升高至约 72°C。一种名为 Taq 聚合酶(一种耐热 DNA 聚合酶)的酶会结合引物,并开始向链上添加核苷酸。它构建一条新的互补 DNA 链,有效地使靶 DNA 的量翻倍。