冰冻切片是一种在患者麻醉期间进行的快速组织诊断方法。它绕过了标准的12-24小时组织处理周期，通过冷冻组织、在低温恒温器上切片、染色，并让病理学家在15-20分钟内报告。结果直接影响手术过程——确定切缘是否干净、淋巴结是否含有肿瘤、或是否获得了足够的诊断组织。

低温恒温器

低温恒温器是一种旋转切片机，封闭在维持在-20至-30°C的冷藏柜中。将新鲜、未固定的组织放在带有包埋介质（OCT化合物——最佳切割温度）的金属夹头上，通过将夹头浸入液氮或放置在速冻条上快速冷冻，然后以4-10 µm厚度切片。在室温下将切片捞到玻片上，通过将冰冻切片熔解到玻璃上而立即固定组织。

冰冻切片的适应症

切缘评估是最常见的适应症。在癌症手术中，外科医生需要知道切除边缘是否无肿瘤。如果冰冻切片显示切缘有肿瘤，外科医生可以立即切除额外组织，避免二次手术。

淋巴结评估用于黑色素瘤和乳腺癌的前哨淋巴结活检，确定肿瘤是否已转移，指导淋巴结清扫的范围。

组织识别确保标本包含诊断组织——对甲状旁腺腺瘤（区分甲状腺、淋巴结或脂肪）、显微手术期间的神经识别以及确认已从深部病变获得用于石蜡切片的组织特别重要。

未知病变的分类可指导即时手术方法——区分炎症性与肿瘤性过程，以及在肿瘤内区分良性和恶性。

技术与染色

冰冻切片通常用快速H&E方案染色：苏木精30-60秒，然后伊红15-30秒，加上简短的脱水和透明步骤。整个染色周期需要2-3分钟。一些实验室也使用甲苯胺蓝（用于肥大细胞和神经纤维）或亚甲蓝（用于甲状旁腺识别）。

质量与局限性

冰冻切片质量本质上不如石蜡切片。冷冻过程产生冰晶伪影，破坏细胞结构，使核细节更粗糙、更不清晰。切片厚度更大（6-10 µm对3-5 µm），降低了光学分辨率。脂肪组织和重度钙化标本切片效果差。

由经验丰富的病理学家对适当标本进行冰冻切片时，诊断准确率为94-98%。假阴性最常发生在感兴趣区域（如淋巴结中的小肿瘤沉积物）未包含在冰冻切片块中时。假阳性罕见，但可能由将反应性非典型性解释为恶性肿瘤引起。某些诊断无法在冰冻切片上做出：许多肿瘤的 definitive 分级、淋巴组织增殖性疾病的诊断以及甲状腺肿瘤的包膜侵犯评估通常推迟到石蜡切片。

冰冻切片特有的伪影

冰晶表现为组织内空的、角状的空间，扭曲结构。快速冷冻（液氮）相比在低温恒温器室中缓慢冷冻可最小化冰晶形成。

断裂线发生在组织太硬或太冷时，导致切片在切割过程中开裂。稍微 warming 块或更慢地切割可能有帮助。

折叠和起皱在冰冻切片中比石蜡切片更常见，因为切片更厚且对玻片的粘附性更差。

脂肪组织的冷冻伪影使脂肪表现为带有薄而破裂的间隔的空泡，限制了脂肪病变的评估。

推迟诊断与石蜡切片

冰冻切片后，剩余组织解冻、在福尔马林中固定，并常规处理用于石蜡切片。石蜡切片诊断取代冰冻切片诊断。冰冻切片与石蜡切片诊断之间的差异在质量保证会议上进行审查。冰冻切片是一种会诊，而非最终诊断——这一区别对于患者安全和法医学文件至关重要。