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Histoquímica de Carboidratos e Mucinas

As colorações histoquímicas para carboidratos e mucinas identificam glicogênio, mucinas neutras e ácidas, glicoproteínas e proteoglicanos. Essas colorações são essenciais para diagnosticar doenças de armazenamento metabólico, identificar tipos tumorais, detectar organismos fúngicos e avaliar patologia gastrointestinal e respiratória.

Ácido Periódico-Schiff (PAS)

O PAS é a coloração de carboidratos mais versátil. O ácido periódico oxida grupos hidroxila vicinais (presentes em glicogênio, glicoproteínas e mucinas) a aldeídos, que então reagem com o reagente de Schiff para produzir uma cor magenta. Estruturas PAS-positivas incluem glicogênio (fígado, músculo cardíaco e esquelético), membranas basais (glomerular e tubular no rim; vascular), muco (epitélio gástrico, intestinal, respiratório), paredes celulares fúngicas e parasitas (Echinococcus, Toxoplasma).

PAS com diástase (PAS-D) usa digestão por amilase para remover o glicogênio antes da coloração PAS. Positividade ao PAS sensível à diástase confirma glicogênio; positividade ao PAS resistente à diástase indica glicoproteínas, mucinas ou material de membrana basal. Esta distinção é crítica — um vacúolo citoplasmático PAS-positivo sensível à diástase contém glicogênio (ex., carcinoma de células claras renais), enquanto um vacúolo resistente contém mucina (ex., adenocarcinoma de células em anel de sinete).

Azul Alciano

O azul alciano é um corante ftalocianina contendo cobre que se liga a mucopolissacarídeos ácidos e glicosaminoglicanos sulfatados. Em pH 2,5, o azul alciano cora mucinas fracamente ácidas (sialomucinas) e fortemente ácidas (sulfatadas) em azul. Em pH 1,0, apenas mucinas fortemente ácidas (sulfatadas) são coradas. Esta seletividade dependente de pH ajuda a caracterizar tipos de mucina.

O azul alciano é usado para identificar metaplasia intestinal (biópsias gástricas — células caliciformes coram em azul) e classificar tumores mucinosos (ovarianos, pancreáticos, apendiculares). O azul alciano-PAS combinado (AB-PAS) distingue mucinas neutras (PAS-positivas, magenta) de ácidas (azul alciano-positivas, azul) em uma única seção. Em patologia pulmonar, o AB-PAS demonstra produção de mucina em adenocarcinoma; em cartilagem, o azul alciano cora proteoglicanos.

Mu cicarmina

A mu cicarmina cora mucinas epiteliais em rosa profundo a vermelho. Ela usa um complexo alumínio-carmim que se liga a mucopolissacarídeos ácidos. A mu cicarmina é mais comumente usada para demonstrar produção de mucina em adenocarcinoma e para identificar a cápsula de Cryptococcus neoformans, que cora intensamente em vermelho (o organismo em si é mu cicarmina-negativo). É mais específica para mucinas epiteliais que o azul alciano, mas menos sensível.

Ferro Colonial

O ferro colonial liga-se a mucinas ácidas em pH baixo e é visualizado pela reação do Azul da Prússia (amarelo-marrom a azul). É mais sensível que o azul alciano para detectar pequenas quantidades de mucinas ácidas, mas tecnicamente mais difícil. O ferro colonial é usado para detectar sialomucinas em metaplasia intestinal precoce e mucinas ácidas em tumores ovarianos.

Carmim de Best

O carmim de Best cora especificamente glicogênio em vermelho. Ele fornece coloração de glicogênio mais forte que o PAS (que cora muitas classes de carboidratos), mas é usado apenas para identificação de glicogênio devido à sua gama de cores limitada. O carmim de Best é usado para confirmar tumores ricos em glicogênio (carcinoma de células claras, sarcoma de Ewing, tumores de células germinativas) quando os resultados de PAS-D são ambíguos.

Aplicações em Patologia

Patologia gastrointestinal usa PAS-azul alciano para classificar metaplasia gástrica e intestinal, esôfago de Barrett e carcinomas mucinosos. Patologia renal usa PAS para avaliar espessamento da membrana basal glomerular, expansão mesangial e integridade da membrana basal tubular. Patologia hepática — PAS-D destaca glóbulos de alfa-1-antitripsina (glóbulos citoplasmáticos magenta resistentes à diástase) e material de armazenamento em células de Kupffer. Doença infecciosa — PAS e GMS são usados juntos para detectar organismos fúngicos; a mu cicarmina identifica especificamente Cryptococcus. Patologia tumoral — colorações de mucina classificam adenocarcinomas (tipos mucinoso, de células em anel de sinete, coloide) e os distinguem de malignidades não mucinosas. O controle de qualidade para colorações de carboidratos requer controles positivos com conteúdo de carboidratos conhecido (fígado para glicogênio, cólon para mucinas, cordão umbilical para proteoglicanos).