Les colorations histochimiques pour les glucides et les mucines identifient le glycogène, les mucines neutres et acides, les glycoprotéines et les protéoglycanes. Ces colorations sont essentielles pour diagnostiquer les maladies de stockage métabolique, identifier les types de tumeurs, détecter les organismes fongiques et évaluer la pathologie gastro-intestinale et respiratoire.
Periodic Acid-Schiff (PAS)
Le PAS est la coloration des glucides la plus polyvalente. L’acide periodique oxyde les groupes hydroxyle vicinaux (présents dans le glycogène, les glycoprotéines et les mucines) en aldéhydes, qui réagissent ensuite avec le réactif de Schiff pour produire une couleur magenta. Les structures PAS-positives incluent le glycogène (foie, muscle cardiaque et squelettique), les membranes basales (glomérulaires et tubulaires dans le rein ; vasculaires), le mucus (épithélium gastrique, intestinal, respiratoire), les parois cellulaires fongiques et les parasites (Echinococcus, Toxoplasma).
PAS avec diastase (PAS-D) utilise une digestion amylasique pour éliminer le glycogène avant la coloration PAS. La positivité PAS sensible à la diastase confirme le glycogène ; la positivité PAS résistante à la diastase indique des glycoprotéines, des mucines ou du matériel de membrane basale. Cette distinction est essentielle — une vacuole cytoplasmique PAS-positive sensible à la diastase contient du glycogène (par exemple, carcinome rénal à cellules claires), tandis qu’une vacuole résistante à la diastase contient de la mucine (par exemple, adénocarcinome à cellules en bague à chaton).
Bleu Alcian
Le Bleu Alcian est un colorant cuivre-phtalocyanine qui se lie aux mucopolysaccharides acides et aux glycosaminoglycanes sulfatés. À pH 2,5, le Bleu Alcian colore à la fois les mucines faiblement acides (sialomucines) et fortement acides (sulfatées) en bleu. À pH 1,0, seules les mucines fortement acides (sulfatées) sont colorées. Cette sélectivité dépendante du pH aide à caractériser les types de mucines.
Le Bleu Alcian est utilisé pour identifier la métaplasie intestinale (biopsies gastriques — les cellules caliciformes se colorent en bleu) et pour classer les tumeurs mucineuses (ovariennes, pancréatiques, appendiculaires). Le Bleu Alcian-PAS combiné (AB-PAS) distingue les mucines neutres (PAS-positives, magenta) des acides (Bleu Alcian-positives, bleues) dans une seule coupe. En pathologie pulmonaire, l’AB-PAS démontre la production de mucine dans l’adénocarcinome ; dans le cartilage, le Bleu Alcian colore les protéoglycanes.
Mucicarmin
Le Mucicarmin colore les mucines épithéliales en rose foncé à rouge. Il utilise un complexe aluminium-carmin qui se lie aux mucopolysaccharides acides. Le Mucicarmin est le plus couramment utilisé pour démontrer la production de mucine dans l’adénocarcinome et pour identifier la capsule de Cryptococcus neoformans, qui se colore intensément en rouge (l’organisme lui-même est mucicarmin-négatif). Il est plus spécifique pour les mucines épithéliales que le Bleu Alcian mais moins sensible.
Fer Colloïdal
Le fer colloïdal se lie aux mucines acides à faible pH et est visualisé par la réaction du Bleu de Prusse (jaune-brun à bleu). Il est plus sensible que le Bleu Alcian pour détecter de petites quantités de mucines acides mais techniquement plus difficile. Le fer colloïdal est utilisé pour détecter les sialomucines dans la métaplasie intestinale précoce et les mucines acides dans les tumeurs ovariennes.
Carmin de Best
Le carmin de Best colore spécifiquement le glycogène en rouge. Il fournit une coloration du glycogène plus forte que le PAS (qui colore de nombreuses classes de glucides) mais est utilisé uniquement pour l’identification du glycogène en raison de sa gamme de couleurs limitée. Le carmin de Best est utilisé pour confirmer les tumeurs riches en glycogène (carcinome à cellules claires, sarcome d’Ewing, tumeurs germinales) lorsque les résultats du PAS-D sont ambigus.
Applications en Pathologie
La pathologie gastro-intestinale utilise le PAS-Bleu Alcian pour classer la métaplasie gastrique et intestinale, l’œsophage de Barrett et les carcinomes mucineux. La pathologie rénale utilise le PAS pour évaluer l’épaississement de la membrane basale glomérulaire, l’expansion mésangiale et l’intégrité de la membrane basale tubulaire. La pathologie hépatique — le PAS-D met en évidence les globules d’alpha-1-antitrypsine (globules cytoplasmiques magentas résistants à la diastase) et le matériel de stockage des cellules de Kupffer. Les maladies infectieuses — le PAS et le GMS sont utilisés ensemble pour détecter les organismes fongiques ; le mucicarmin identifie spécifiquement Cryptococcus. La pathologie tumorale — les colorations des mucines classifient les adénocarcinomes (types mucineux, à cellules en bague à chaton, colloïde) et les distinguent des malignités non mucineuses. Le contrôle qualité pour les colorations des glucides nécessite des contrôles positifs avec un contenu glucidique connu (foie pour le glycogène, côlon pour les mucines, cordon ombilical pour les protéoglycanes).
