La histopatología es el examen microscópico de tejido enfermo. Antes de que un patólogo pueda evaluar una muestra, el tejido debe pasar por una serie de pasos preparatorios que preservan la estructura, endurecen la muestra para el corte y producen secciones lo suficientemente delgadas para transmitir luz. La calidad del diagnóstico final depende directamente de la calidad del procesamiento y el corte.

Fijación

La fijación preserva la arquitectura del tejido mediante entrecruzamiento de proteínas e inactivación de enzimas degradativas. El fijador más común es la formalina tamponada neutra al 10% (NBF), una solución de formaldehído al 3.7% que forma puentes de metileno entre grupos amino, estabilizando la estructura de las proteínas sin causar contracción excesiva. El tiempo de fijación depende del tamaño del tejido — una biopsia típica requiere 6-24 horas, mientras que muestras más grandes pueden necesitar 24-48 horas. La fijación insuficiente deja el tejido vulnerable a la autólisis; la fijación excesiva causa entrecruzamiento excesivo que enmascara antígenos para la inmunohistoquímica.

Procesamiento

Después de la fijación, el tejido debe ser infiltrado con un medio de soporte sólido — típicamente parafina — antes del corte. El procesamiento ocurre en un procesador de tejidos automatizado durante 12-24 horas: deshidratación (etanoles graduados 70-100%), aclaramiento (xileno), infiltración (parafina fundida al vacío).

Inclusión

La inclusión orienta el tejido en un bloque de parafina para el corte. La orientación correcta es crítica — la mayoría de las biopsias se incluyen para presentar el área transversal máxima al cuchillo del micrótomo.

Micotomía

El corte se realiza en un micrótomo rotatorio que avanza el bloque de parafina en incrementos precisos — típicamente 3-5 µm. La tira de secciones flota en un baño de agua caliente (40-45°C) para aplanar arrugas y se recoge en portaobjetos de vidrio.

Artefactos Comunes

Marcas de cuchillo, compresión, chatter (bandas alternas gruesas y delgadas), pliegues, burbujas. La tinción H&E posterior revela detalles nucleares y citoplasmáticos.

Control de Calidad

Cada portaobjetos teñido debe verificarse para grosor de sección (3-5 µm uniforme), ausencia de pliegues y representación completa del tejido.