Neurohistologi adalah studi tentang anatomi mikroskopis sistem saraf — otak, sumsum tulang belakang, saraf perifer, dan organ sensorik. Jaringan saraf menghadirkan tantangan unik untuk histopatologi karena kandungan lipidnya yang tinggi, arsitektur seluler yang kompleks, dan kerentanan selektif berbagai tipe sel terhadap penyakit.
Organisasi Sistem Saraf
Sistem saraf pusat (CNS) — otak dan sumsum tulang belakang — terdiri dari materi abu-abu (badan sel neuron, dendrit, sinapsis, sel glial) dan materi putih (akson bermielin dan oligodendrosit). Sistem saraf perifer (PNS) terdiri dari saraf kranial, saraf spinal, dan ganglia perifer, dengan sel Schwann menggantikan oligodendrosit sebagai sel mielinasi.
Neuron adalah unit fungsional — sel besar dengan pohon dendritik khusus dan akson panjang. Ukuran, bentuk, dan kandungan neurotransmitter mereka bervariasi menurut wilayah: neuron piramidal (korteks serebral), sel Purkinje (serebelum), neuron motorik (tanduk anterior sumsum tulang belakang), dan neuron sensorik (ganglia akar dorsal). Sel glial melebihi jumlah neuron 10:1 dan meliputi: astrosit (dukungan, metabolisme glutamat, sawar darah-otak — GFAP-positif), oligodendrosit (produksi mielin CNS — Olig2-positif), mikroglia (sel imun residen — Iba1, CD68-positif), dan sel ependimal (melapisi ventrikel).
Penanganan Jaringan dan Fiksasi
Jaringan otak sangat lunak dan harus difiksasi secara memadai sebelum pemotongan. Fiksasi seluruh otak memerlukan 7-14 hari dalam 10% NBF. Pemotongan koronal serebrum, pemotongan transversal batang otak dan sumsum tulang belakang, dan pemotongan sagital serebelum adalah standar. Spesimen biopsi (biopsi otak stereotaktik) berukuran kecil (inti 1-2 mm) dan memerlukan penanganan hati-hati — sering dibungkus dalam kertas lensa sebelum pemrosesan untuk mencegah kehilangan fragmen.
Fiksatif khusus untuk neurohistologi meliputi larutan Bouin (pituitari dan daerah otak terkait endokrin), glutaraldehida (untuk mikroskop elektron saraf dan otot), dan formalin buffer (rutin). Pemrosesan parafin adalah standar untuk neuropatologi diagnostik; irisan beku digunakan untuk konsultasi intra-operatif (persiapan smear atau irisan kriostat).
Pewarnaan Neurohistologis Standar
H&E adalah pewarnaan utama untuk detail seluler — substansi Nissl neuronal (RE kasar — granula basofilik), morfologi inti, dan identifikasi sel glial. Luxol Fast Blue (LFB) mewarnai mielin biru-hijau dan merupakan pewarnaan standar untuk mengevaluasi mielinasi dan demielinasi. LFB dengan counterstain H&E (LFB-HE) atau LFB-PAS menunjukkan mielin dan morfologi seluler dalam satu irisan. LFB dengan Cresyl Violet (LFB-CV) — kombinasi “luxol fast blue-cresyl violet” mewarnai mielin biru dan neuron ungu, digunakan untuk studi sitoarsitektural.
Pewarnaan perak Bielschowsky mengimpregnasi neurofibril dan plak neuritik, menunjukkan kusut neurofibrilar (penyakit Alzheimer), plak neuritik, dan badan Pick (penyakit Pick). Pewarnaan perak Bodian serupa, memvisualisasikan akson dan neurofibril.
Identifikasi Sel Glial oleh IHC
IHC sebagian besar telah menggantikan pewarnaan histokimia tradisional untuk identifikasi tipe sel dalam neuropatologi. GFAP (glial fibrillary acidic protein) — penanda definitif astrosit dan tumor astrositik (astrocytoma, glioblastoma). Olig2 — penanda inti oligodendrosit dan tumor oligodendroglial. Iba1 dan CD68 — penanda mikroglia/makrofag, diregulasi dalam inflamasi dan neurodegenerasi. NeuN — protein inti neuron, mengidentifikasi neuron matang dan hilang pada banyak penyakit neurodegeneratif. Neurofilamen (NF) — penanda aksonal, menunjukkan densitas aksonal, spheroid, dan torpedo. Synaptophysin — protein vesikel sinaps, mengidentifikasi densitas sinaps pada kondisi neurodegeneratif.
Daerah Khusus
Hippocampus — daerah CA1 secara selektif rentan terhadap anoksia dan iskemia. Sklerosis hippocampal terkait dengan epilepsi lobus temporal. Substantia nigra — neuron berpigmen yang mengalami degenerasi pada penyakit Parkinson; pigmen neuromelanin terlihat pada H&E tanpa pewarnaan khusus. Serebelum — sel Purkinje secara selektif rentan terhadap hipoksia, toksin, dan sindrom paraneoplastik. Sumsum tulang belakang — kehilangan neuron motorik pada amyotrophic lateral sclerosis (ALS).
Artefak
Neuron gelap — neuron menyusut, hipereosinofilik akibat fiksasi tertunda atau penanganan traumatis otak tanpa fiksasi. Mereka dapat disalahartikan sebagai cedera iskemik atau hipoksik. Artefak pusaran — dari disrupsi jaringan traumatis selama biopsi stereotaktik. Artefak kauter — dari elektrokauter yang digunakan selama reseksi bedah, menyebabkan nekrosis koagulatif di tepi jaringan. Artefak beku — dari krioproteksi tidak memadai pada irisan beku.
