质粒纯化，也称为小量制备，是一种从细菌细胞中分离小型环状DNA分子（质粒）的技术。质粒常用作分子克隆中的载体，纯化质粒对于测序、转染和进一步操作至关重要。

质粒纯化的原理

1. 细菌培养

将含有目标质粒的单个细菌菌落在含有适当抗生素的液体培养基中过夜培养。这确保细菌维持质粒并产生足够的量用于提取。

2. 细胞收获和裂解

离心细菌培养物以沉淀细胞。用含有RNase（用于消化RNA）的缓冲液重悬沉淀，然后用含有SDS和氢氧化钠的碱性裂解液处理。这破坏细胞并变性DNA。

3. 中和

加入含有乙酸钾的中和缓冲液。高盐浓度使变性的染色体DNA和蛋白质沉淀，而较小、超螺旋的质粒DNA保留在溶液中。离心混合物，收集含有质粒的上清液。

4. 结合和洗涤

将上清液通过硅胶膜柱，在使质粒DNA结合的条件下操作。洗涤缓冲液去除残留的污染物，如盐、蛋白质和RNA。

5. 洗脱

使用低盐缓冲液或水从膜上释放纯化的质粒DNA。得到的DNA纯度足够用于测序、限制性酶切或真核细胞转染。