La cytologie en milieu liquide (LBC) a largement remplacé la préparation conventionnelle de frottis pour la cytologie cervicale et est de plus en plus adoptée pour les échantillons non gynécologiques. En collectant les cellules dans un liquide de conservation, la LBC permet une qualité de lame constante, une réduction du matériel masquant et — crucialement — des tests moléculaires réflexes à partir de l’échantillon résiduel.
Plateformes LBC
ThinPrep (Hologic) — le dispositif de collecte est rincé dans une solution PreservCyt (à base de méthanol). Le processeur disperse les cellules, les collecte sur un filtre en polycarbonate et les transfère sur une lame dans un cercle de 20 mm de diamètre. La monocouche standardisée réduit le chevauchement cellulaire et le sang ou l’inflammation masquants.
SurePath (BD) — le dispositif de collecte est rincé dans une solution CytoRich. Le processeur utilise une centrifugation en gradient de densité pour séparer les cellules diagnostiques du sang, du mucus et des débris avant de déposer les cellules dans un cercle de 13 mm. SurePath produit des lames plus propres pour les échantillons sanglants.
Avantages de la LBC
Taux d’insatisfaisant réduit — la LBC diminue les tests Pap insatisfaisants de 5-15% à 1-3% en filtrant le sang masquant, l’inflammation et les groupes de cellules épaisses. Sensibilité améliorée — les méta-analyses montrent que la LBC a une sensibilité équivalente ou légèrement supérieure pour HSIL+ par rapport aux frottis conventionnels. Échantillon résiduel — le liquide PreservCyt ou CytoRich restant (généralement 10-20 mL) est disponible pour les tests HPV, les tests Chlamydia/Gonorrhée et l’analyse de biomarqueurs moléculaires. Lames multiples — des lames supplémentaires peuvent être préparées à partir du même flacon pour des colorations spéciales ou l’IHC.
LBC en Cytologie Non Gynécologique
La LBC est de plus en plus utilisée pour les liquides biologiques, l’urine, les échantillons FNA et les échantillons respiratoires. Les avantages incluent une préparation cellulaire concentrée, l’élimination du sang masquant et un fond constant. Les inconvénients incluent la perte d’indices architecturaux (les amas tridimensionnels peuvent être dispersés) et des changements dans la morphologie cellulaire (les cellules apparaissent plus petites, la chromatine moins nette que dans les frottis conventionnels). Les laboratoires doivent valider la LBC par rapport aux préparations conventionnelles pour chaque type d’échantillon non gynécologique.
Tests HPV à Partir de la LBC
Les échantillons cervicaux LBC sont le prélèvement principal pour les tests HR-HPV. Les méthodes d’amplification du signal (Hybrid Capture 2, Cervista) détectent l’ADN HPV à partir d’un pool de 13-14 types à haut risque sans génotypage. Les méthodes d’amplification de cible (basées sur PCR : Cobas 4800, Aptima) détectent et génotypent HPV 16 et 18 séparément des autres types HR. Le Cobas 4800 est approuvé par la FDA pour le dépistage HPV primaire et le co-test. L’Aptima détecte l’ARNm E6/E7, indiquant une infection transcriptionnellement active plutôt qu’un ADN HPV transitoire. Les tests HPV à partir de la LBC ont une sensibilité et une spécificité équivalentes aux tests effectués sur des échantillons cervicaux collectés séparément.
Tests Moléculaires à Partir d’Échantillons Cytologiques
FISH (hybridation in situ en fluorescence) sur des échantillons cytologiques détecte les anomalies chromosomiques. Le FISH UroVysion (chromosomes 3, 7, 17 et 9p21) augmente la sensibilité pour le carcinome urothélial dans la cytologie urinaire. Le FISH ALK break-apart sur les blocs cellulaires de FNA pulmonaire identifie l’adénocarcinome réarrangé ALK.
Tests basés sur PCR sur des échantillons cytologiques détectent les mutations (EGFR, KRAS, BRAF), l’ADN viral (HPV, EBV, CMV) et la clonalité (réarrangements des gènes IgH et TCR pour le lymphome). L’ADN provenant de lames de cytologie ou de blocs cellulaires est adéquat pour la plupart des applications PCR. La sensibilité est comparable aux échantillons histologiques.
Séquençage de nouvelle génération (NGS) — les blocs cellulaires provenant de FNA et d’échantillons d’épanchement fournissent suffisamment d’ADN pour des panels NGS ciblés (50-500 gènes). Le profilage génomique complet à partir d’échantillons cytologiques guide la sélection des thérapies ciblées. Les taux de succès (ADN adéquat pour NGS) dépassent 90% lorsque les blocs cellulaires contiennent au moins 20% de cellularité tumorale.
Qualité et Validation
Les tests moléculaires sur des échantillons cytologiques nécessitent une validation par rapport à l’histologie ou au statut mutationnel connu. Les variables pré-analytiques incluent le type de fixateur (PreservCyt à base de méthanol vs éthanol), le temps et la température de stockage, et la concentration cellulaire. Les laboratoires doivent établir des exigences minimales de cellularité et documenter l’adéquation de l’échantillon pour les tests moléculaires. Les programmes d’assurance qualité incluent des tests de compétence pour les tests moléculaires sur matériel cytologique.
Orientations Futures
Cytologie numérique — l’imagerie de lames entières de lames LBC permet la révision à distance, le dépistage assisté par ordinateur et la détection basée sur l’intelligence artificielle des cellules anormales. Panels de biomarqueurs multiplex — l’analyse des protéines (IHC) et des acides nucléiques (FISH, mutation) à partir du même bloc cellulaire fournit un diagnostic intégré et une sélection thérapeutique. Cellules tumorales circulantes (CTC) et biopsie liquide (ADN acellulaire du sang) étendent la cytologie au-delà de l’échantillonnage tissulaire solide vers la détection et la surveillance non invasives du cancer. Ces technologies complètent plutôt qu’elles ne remplacent la cytomorphologie traditionnelle, et leur interprétation nécessite une intégration avec le contexte clinique et d’imagerie.
