Sitologi berbasis cairan (LBC) telah sebagian besar menggantikan persiapan apusan konvensional untuk sitologi serviks dan semakin banyak diadopsi untuk spesimen non-ginekologi. Dengan mengumpulkan sel ke dalam cairan pengawet, LBC memungkinkan kualitas kaca objek yang konsisten, pengurangan material yang mengaburkan, dan — yang kritis — pengujian molekuler refleks dari sisa sampel.
Platform LBC
ThinPrep (Hologic) — alat pengumpul dibilas ke dalam larutan PreservCyt (berbasis metanol). Pemroses mendispersi sel, mengumpulkannya pada filter polikarbonat, dan mentransfernya ke kaca objek dalam lingkaran diameter 20 mm. Monolapisan terstandarisasi mengurangi tumpang tindih sel dan darah atau inflamasi yang mengaburkan.
SurePath (BD) — alat pengumpul dibilas ke dalam larutan CytoRich. Pemroses menggunakan sentrifugasi gradien densitas untuk memisahkan sel diagnostik dari darah, lendir, dan debris sebelum mendepositkan sel dalam lingkaran 13 mm. SurePath menghasilkan kaca objek yang lebih bersih untuk spesimen berdarah.
Kelebihan LBC
Tingkat tidak memuaskan yang berkurang — LBC menurunkan tes Pap tidak memuaskan dari 5-15% menjadi 1-3% dengan menyaring darah, inflamasi, dan kelompok sel tebal yang mengaburkan. Sensitivitas yang lebih baik — meta-analisis menunjukkan LBC memiliki sensitivitas setara atau sedikit lebih tinggi untuk HSIL+ dibandingkan apusan konvensional. Sisa sampel — cairan PreservCyt atau CytoRich yang tersisa (biasanya 10-20 mL) tersedia untuk pengujian HPV, pengujian Chlamydia/Gonore, dan analisis biomarker molekuler. Banyak kaca objek — kaca objek tambahan dapat dibuat dari vial yang sama untuk pewarnaan khusus atau IHC.
LBC dalam Sitologi Non-Ginekologi
LBC semakin banyak digunakan untuk cairan tubuh, urin, spesimen FNA, dan sampel pernapasan. Kelebihan meliputi persiapan sel yang pekat, penghilangan darah yang mengaburkan, dan latar belakang yang konsisten. Kekurangan meliputi hilangnya petunjuk arsitektural (kelompok tiga dimensi mungkin terdispersi) dan perubahan morfologi seluler (sel tampak lebih kecil, kromatin kurang tajam dibandingkan apusan konvensional). Laboratorium harus memvalidasi LBC terhadap persiapan konvensional untuk setiap tipe spesimen non-ginekologi.
Pengujian HPV dari LBC
Sampel LBC serviks adalah spesimen utama untuk pengujian HR-HPV. Metode amplifikasi sinyal (Hybrid Capture 2, Cervista) mendeteksi DNA HPV dari kumpulan 13-14 tipe risiko tinggi tanpa genotipe. Metode amplifikasi target (berbasis PCR: Cobas 4800, Aptima) mendeteksi dan menentukan genotipe HPV 16 dan 18 secara terpisah dari tipe HR lainnya. Cobas 4800 disetujui FDA untuk skrining HPV primer dan pengujian bersama. Aptima mendeteksi mRNA E6/E7, yang mengindikasikan infeksi transkripsional aktif daripada DNA HPV sementara. Pengujian HPV dari LBC memiliki sensitivitas dan spesifisitas setara dengan pengujian dari spesimen serviks yang dikumpulkan secara terpisah.
Pengujian Molekuler dari Sampel Sitologi
FISH (fluoresensi in situ hibridisasi) pada spesimen sitologi mendeteksi abnormalitas kromosom. UroVysion FISH (kromosom 3, 7, 17 dan 9p21) meningkatkan sensitivitas untuk karsinoma urothelial pada sitologi urin. ALK break-apart FISH pada blok sel FNA paru mengidentifikasi adenokarsinoma dengan rearrangement ALK.
Pengujian berbasis PCR pada sampel sitologi mendeteksi mutasi (EGFR, KRAS, BRAF), DNA virus (HPV, EBV, CMV), dan klonalitas (rearrangement gen IgH dan TCR untuk limfoma). DNA dari kaca objek sitologi atau blok sel memadai untuk sebagian besar aplikasi PCR. Sensitivitas sebanding dengan sampel histologi.
Pengurutan generasi berikutnya (NGS) — blok sel dari FNA dan spesimen efusi menyediakan DNA yang cukup untuk panel NGS tertarget (50-500 gen). Profil genomik komprehensif dari sampel sitologi memandu pemilihan terapi tertarget. Tingkat keberhasilan (DNA yang memadai untuk NGS) melebihi 90% ketika blok sel mengandung setidaknya 20% selularitas tumor.
Mutu dan Validasi
Pengujian molekuler pada spesimen sitologi memerlukan validasi terhadap histologi atau status mutasi yang diketahui. Variabel pra-analitik meliputi tipe fiksatif (PreservCyt berbasis metanol vs. etanol), waktu dan suhu penyimpanan, dan konsentrasi sel. Laboratorium harus menetapkan persyaratan selularitas minimal dan mendokumentasikan adekuasi sampel untuk pengujian molekuler. Program jaminan mutu mencakup uji profisiensi untuk pengujian molekuler pada material sitologi.
Arah Masa Depan
Sitologi digital — pencitraan seluruh kaca objek dari kaca objek LBC memungkinkan tinjauan jarak jauh, skrining berbantuan komputer, dan deteksi sel abnormal berbasis kecerdasan buatan. Panel biomarker multipleks — analisis protein (IHC) dan asam nukleat (FISH, mutasi) dari blok sel yang sama menyediakan diagnosis dan pemilihan terapi terintegrasi. Sel tumor yang bersirkulasi (CTC) dan biopsi cair (DNA bebas sel dari darah) memperluas sitologi melampaui pengambilan sampel jaringan padat ke deteksi dan pemantauan kanker non-invasif. Teknologi ini melengkapi daripada menggantikan sitomorfologi tradisional, dan interpretasinya memerlukan integrasi dengan konteks klinis dan pencitraan.
