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移液、稀释与溶液制备

June 8, 2026

准确的液体处理是任何实验室中最频繁的手工操作。此阶段的错误会传播到后续的每个步骤,因此移液技术和溶液制备对于可重复性至关重要。

移液原理

空气置换式移液器的工作原理是在活塞和液体之间形成气垫。体积通过机械或数字方式设定,活塞置换相应体积的空气来吸液或排液。

为获得准确移液,吸液时保持移液器垂直。将吸头浸入液面下 2–4 mm(微升级体积),更大体积则更深。将活塞按至第一档,缓慢平稳地吸取液体,然后将吸头沿容器壁抽出。排液时按至第一档,停顿,然后按至第二档以吹出残留液体。

常见移液误差

  • 预润湿:在正式转移前吸排液体 2–3 次可湿润气垫并减少蒸发损失。
  • 温度效应:气垫随温度膨胀或收缩。移液器和液体均应处于室温。
  • 粘性液体:反向移液(按至第二档吸液,按至第一档排液)可提高粘性或发泡溶液的准确性。
  • 吸头选择:使用与移液器品牌匹配的正确吸头。低吸附吸头可减少蛋白质和去垢剂的样品损失。

制备溶液

质量/体积百分比溶液通过将称量的溶质溶解在溶剂中并定容至最终体积来制备。摩尔溶液通过根据分子量计算摩尔数、溶解并在容量瓶中定容来制备。

始终将溶质加入到部分体积的溶剂中,旋摇溶解,然后定容至刻度。切勿在容量瓶中向干溶质直接加入溶剂——体积可能会超过刻度。

系列稀释与储备液稀释

储备液是浓缩溶液,被稀释至工作浓度。稀释因子是最终体积与等分体积之比:

C₁V₁ = C₂V₂

系列稀释是一种逐步稀释系列,每一步按恒定因子(通常为 10 倍或 2 倍)稀释。这是为标准曲线、MIC 测定或细胞毒性测试生成对数浓度范围的最有效方法。

制备稀释系列时,每一步都要充分混匀,并在转移之间更换移液器吸头以避免交叉污染。