Ekstraksi lipid adalah langkah mendasar dalam analisis makanan untuk pelabelan nutrisi, penilaian kualitas, dan tujuan penelitian. Pilihan metode ekstraksi bergantung pada matriks makanan, jenis lipid yang ada, dan apakah kelas lemak total atau lipid spesifik yang diinginkan.
Ekstraksi Soxhlet
Metode Soxhlet adalah teknik referensi klasik untuk penentuan lemak total. Sampel kering ditempatkan dalam bidal selulosa dan berulang kali diekstraksi dengan pelarut organik mendidih, biasanya petroleum eter atau n-heksana, selama 4–24 jam. Pelarut kemudian diuapkan, dan sisa lemak ditimbang. Ekstraksi Soxhlet sederhana, dapat direproduksi, dan sudah mapan untuk mematuhi peraturan. Namun, proses ini memakan waktu, menggunakan pelarut dalam jumlah besar, dan hanya mengekstrak lipid non-polar — lipid polar seperti fosfolipid sulit diperoleh kembali.
Metode Folch
Metode Folch (ekstraksi kloroform-metanol) banyak digunakan untuk ekstraksi lipid total, khususnya untuk jaringan dengan kadar air tinggi. Sampel dihomogenisasi dengan campuran kloroform dan metanol 2:1 (v/v). Setelah penambahan air atau larutan garam, campuran dipisahkan menjadi dua fase: fase kloroform bagian bawah yang mengandung lipid dan fase air bagian atas yang mengandung kontaminan non-lipid. Fase lipid dikumpulkan, dikeringkan, dan ditimbang. Metode ini secara efisien mengekstraksi lipid polar dan non-polar, termasuk fosfolipid dan glikolipid.
Metode Bligh-Dyer
Metode Bligh-Dyer merupakan modifikasi dari prosedur Folch yang menggunakan rasio pelarut terhadap sampel yang lebih rendah, sehingga lebih praktis untuk volume sampel yang besar. Proporsi kloroform, metanol, dan air disesuaikan untuk menciptakan sistem ekstraksi satu fase, yang kemudian dipecah menjadi dua fase melalui pengenceran dengan air dan kloroform. Metode ini sangat cocok untuk sampel dengan kadar air tinggi, seperti ikan dan makanan laut.
Ekstraksi Cairan Superkritis
Ekstraksi fluida superkritis (SFE) menggunakan karbon dioksida (CO2) adalah alternatif ekstraksi pelarut yang modern dan ramah lingkungan. CO2 di atas titik kritisnya (31,1 °C, 73,8 bar) memiliki kepadatan seperti cairan dan difusivitas seperti gas, sehingga memungkinkan ekstraksi lipid secara efisien. Penambahan modifier seperti etanol dapat meningkatkan ekstraksi lipid polar. SFE menghilangkan kebutuhan akan pelarut organik, mengurangi waktu analisis, dan dapat digabungkan langsung dengan analisis kromatografi. Keterbatasan utamanya adalah tingginya biaya peralatan awal.
Hidrolisis Asam
Untuk sampel yang mengandung lipid terikat, seperti makanan yang dipanggang, pasta, dan makanan ringan, hidrolisis asam diperlukan untuk melepaskan lipid yang terperangkap dalam matriks pati atau protein. Sampel direbus dengan asam klorida untuk memutus ikatan antara lipid dan komponen makanan lainnya, dilanjutkan dengan penyaringan dan ekstraksi dengan pelarut organik. Lemak yang diekstraksi kemudian dikeringkan dan ditimbang.
Metode Khusus Produk Susu
Metode Mojonnier adalah metode resmi penentuan lemak pada produk susu. Ini menggunakan ekstraksi berurutan dengan etil eter dan petroleum eter, diikuti dengan penguapan pelarut dan pengukuran gravimetri. Metode Gerber, khusus untuk susu dan krim, melibatkan pencernaan protein dengan asam sulfat dan pemisahan lemak dengan sentrifugasi dalam butirometer, di mana persentase lemak dibaca langsung dari skala yang dikalibrasi. Pilihan metode ekstraksi bergantung pada matriks makanan dan tujuan penggunaan [lipid] yang diekstraksi(/guides/lipids-and-oils.html). Kandungan kelembapan harus diketahui agar dapat memberikan hasil secara konsisten.
