抗体筛查(间接抗球蛋白试验,IAT)和交叉配血是重要的输血前相容性程序。这些测试检测患者血浆中具有临床意义的抗体,这些抗体可能导致胎儿和新生儿溶血性输血反应或溶血病。
间接抗球蛋白测试 (IAT)
IAT 在患者血浆中检测到意外的红细胞抗体。将患者血浆与已知抗原表型的试剂筛选红细胞(通常是两个或三个细胞组,涵盖临床上重要的抗原,包括 D、C、c、E、e、K、k、Fyᵃ、Fyᵇ、Jkᵃ、Jkᵇ、Leᵃ、Leᵇ、M、N、S、s、P1)一起孵育。在 37°C 孵育以允许抗体结合后,洗涤细胞以去除未结合的免疫球蛋白。添加抗人球蛋白(AHG,Coombs 试剂),桥接细胞结合的 IgG 抗体,如果存在抗体,则会引起凝集。 IAT 可以在试管、凝胶柱(微柱)或固相方法中进行,凝胶和固相可提供更高的标准化和灵敏度。
抗体鉴定
When the antibody screen is positive, identification is performed by testing the patient plasma against a panel of 11–16 phenotyped RBCs.分析反应模式以确定抗体特异性。多种抗体可能同时存在,需要仔细排除。常见的具有临床意义的抗体的特征包括:抗 K(IgG,强烈记忆反应)、抗 Fyᵃ(IgG,剂量效应)、抗 Jkᵃ(IgG,难以检测,与迟发性溶血反应相关)、抗 M(通常为 IgM,冷反应性,通常在 37°C 时临床上不显着)和抗 E(IgG,常见)。在怀孕期间测量具有临床意义的抗体的抗体滴度,以评估 HDFN 风险。
交叉匹配
交叉配血是对供体红细胞和预期受体之间兼容性的最终检查。存在三种方法。 立即旋转交叉配型通过在室温下将受体血浆与供体红细胞混合并检查凝集来检测 ABO 不相容性。 抗球蛋白交叉配型(AHG 交叉配型) 是最灵敏的,将受体血浆与供体红细胞在 37°C 下孵育,然后进行 AHG,检测所有临床重要抗原的抗体。当患者的抗体筛查结果为阴性并且没有临床意义的抗体史时,使用计算机(电子)交叉配血,依靠计算机验证供体单位和受体类型之间的 ABO 兼容性。
具有临床意义的抗体
如果抗体可引起溶血性输血反应、HDFN 或红细胞存活率降低,则被归类为具有临床意义。最重要的是针对 ABO(IgM,血管内溶血)、Rh(D、C、c、E、e — IgG,血管外溶血)、Kell(K、k — IgG,强免疫原性)、Duffy(Fyᵃ、Fyᵇ — IgG,与迟发型反应相关)、Kidd(Jkᵃ、Jkᵇ — IgG,涉及迟发性溶血反应,容易发生检测不到的水平)和 MNS(S,s — IgG)。临床上不显着的抗体(通常是 IgM,冷反应性,37°C 时不反应)包括抗 Leᵃ、抗 Leᵇ、抗 I、抗 P1 和大多数抗 M。区分需要热振幅测试和抗原分型。
特别注意事项
抗体筛查呈阳性的患者需要抗原阴性的红细胞单位进行输血。血库必须维持同种免疫患者表型供体单位的库存。温性自身免疫性溶血性贫血 (AIHA) 患者面临特殊的挑战,因为自身抗体会导致 IAT 和交叉配型中的泛反应性。解决自身抗体干扰的技术包括自动控制测试、冷吸附和负载吸附以检测潜在的同种抗体。最近有输血史或 3 个月内怀孕史的患者可能会有阴性抗体筛查,但由于低水平同种抗体低于检测阈值,仍面临迟发性溶血反应的风险。
质量控制和文档
所有抗体筛选和交叉配血程序都需要日常质量控制:验证试剂完整性(AHG、筛选细胞、增强培养基)、阳性和阴性对照以及所有结果的记录。必须检查患者的历史记录以了解以前的抗体。输血反应调查需要输血后抗体筛查、直接抗球蛋白测试以及与输血单位重复交叉配血。