明视野显微镜是组织病理学的主力——每张染色的玻片都在透射白光下进行检查。偏振光显微镜增加了检测双折射（双折射性）物质（如淀粉样蛋白、胶原和晶体）的能力。

明视野显微镜

明视野显微镜从下方用白光照射标本；染色的组织吸收特定波长，通过差异光吸收产生对比度。关键组件包括光源（卤素或LED）、聚光器（将光聚焦在标本上）、物镜（4x、10x、20x、40x、60x、100x）和目镜（10x）。总放大倍数 = 物镜 × 目镜。

Köhler照明是确保均匀、无眩光照明的标准对准方法。步骤包括聚焦聚光器、居中视野光圈以及将孔径光圈调整到物镜数值孔径的70-80%。正确的Köhler对准可最大化分辨率和对比度，同时最小化眼睛疲劳。

物镜选择取决于所检查的结构。扫描物镜（4x）查看组织结构。低倍物镜（10x）显示一般组织学并识别病变。高倍干镜（20x、40x）检查细胞细节。油浸物镜（60x、100x）解析亚细胞结构和微生物。浸油匹配玻璃的折射率，减少光散射。

对比增强技术

相差将折射率差异转化为对比度差异，用于观察活体未染色细胞，但在常规组织病理学中很少需要。

暗视野显微镜使用特殊的聚光器引导斜射光，使未染色物体在暗背景下显得明亮。它对检测组织切片中的螺旋体和细长细菌敏感。

**微分干涉差（DIC）**使用偏振光和棱镜创建三维浮雕图像，用于观察未染色结构和计数核分裂象。

偏振光显微镜

偏振光显微镜使用两个偏振滤光片：聚光器下方的起偏器和物镜上方的检偏器。当滤光片交叉（90°）时，除非标本含有旋转偏振平面的双折射材料，否则没有光到达目镜。

淀粉样蛋白用刚果红染色，在交叉偏振器下显示苹果绿色双折射——淀粉样变性的诊断金标准。双折射来源于淀粉样原纤维的β-折叠片结构。

胶原由于其高度有序的纤维结构而天然具有双折射性。偏振增强结缔组织染色中胶原的可见性，并可帮助分级纤维化。

晶体——尿酸（痛风）、焦磷酸钙（假性痛风）、胱氨酸和二氧化硅——具有明亮的双折射性。偏振光显微镜对于识别滑液和组织切片中的晶体类型至关重要。

肺组织中的石棉小体在偏振光下显示特征性的双折射核心。

病理学家的实际考虑

多头教学显微镜允许多个观察者同时查看，用于共识诊断和质量保证审查。人机工程学很重要——可调节的椅子高度、倾斜的显微镜头和扶手可防止长时间查看过程中的重复性劳损。清洁——镜头只能用镜头纸和批准的溶液清洁；每次使用后必须从物镜上清除浸油。校准——目镜测微尺测量物体尺寸；载物台测微尺校准测量系统。数码相机安装在显微镜上，用于捕获图像用于报告、教学和数字病理学存档。定期显微镜维护（每年专业清洁和对准）可保持光学性能。