外周血涂片 (PBS) 是一项基本实验室技术，可对自动 CBC 结果进行视觉确认，并能够检测分析仪无法可靠识别的形态学异常。每个医学实验室科学家都必须掌握血涂片的制备、染色和系统检查。

高质量涂片的制备

通过将一小滴 EDTA 抗凝血液（或毛细血管血）放在干净载玻片的一端附近来制备楔形涂片。第二个展开器滑块以 30-45° 角固定，后退到液滴中，直到血液沿其边缘扩散，然后平稳地向前推动以形成羽状边缘。理想的涂片具有由厚到薄的逐渐过渡，羽状边缘占据玻片长度的 1-2 厘米。应通过挥动载玻片使涂片快速风干。常见的伪影包括孔洞（脂肪血、干燥缓慢）、厚度不规则（吊具压力不均匀）和长尾（吊具角度太低）。然后将涂片在无水甲醇中固定 30 秒，然后染色。

赖特-吉姆萨染色

罗曼诺夫斯基型染色剂（赖特、吉姆萨或赖特-吉姆萨组合）是血涂片染色的标准。这些染色剂含有天蓝色 B（碱性，将核酸染色为蓝紫色）和曙红 Y（酸性，将血红蛋白和嗜酸性粒细胞染色为橙红色）。染色方案包括用瑞氏染色剂淹没固定涂片 1-2 分钟，然后添加缓冲溶液 2-4 分钟以促进差异染色，然后用水冲洗。正确染色的涂片可显示粉红色红细胞、蓝紫色细胞核和 RNA，以及不同的颗粒颜色。过度染色会产生深色、浑浊的颜色；染色不足产生苍白、分化差的细胞。

系统涂片检查

检查以低倍率（10 倍物镜）开始，评估整体质量，选择最佳计数区域，并识别 WBC 分布异常（淋巴细胞增多或 CLL 中的边缘效应）、羽状边缘的血小板团块以及红细胞轮状或凝集。白细胞分类和形态学评估是在计数区（红细胞轻微重叠但不堆积的区域）中进行 50 倍或 100 倍油浸时进行的。至少对 100 个白细胞进行计数和分类以进行手动分类。检查依次包括三个方面：血小板估计和形态、红细胞形态（大小、形状、颜色、内含物）以及白细胞形态和分类。

红细胞形态评估

红细胞形状异常（异色红细胞）提供诊断线索。球形红细胞（小、致密、中央无苍白）提示遗传性球形红细胞增多症或 AIHA。裂细胞（碎片细胞）表明微血管病性溶血性贫血（TTP、HUS、DIC）。镰状细胞证实镰状细胞病。靶细胞见于地中海贫血、肝病和 HbC 疾病。椭圆形红细胞提示遗传性椭圆形红细胞增多症。泪滴细胞（达克罗细胞）伴有核红细胞提示骨髓纤维化或骨髓浸润。棘细胞（刺细胞）出现在肝脏疾病和无β脂蛋白血症中。棘红细胞（毛刺细胞）通常是伪影，但可以表明尿毒症。红细胞内含物包括嗜碱性点画（铅中毒、地中海贫血）、Howell-Jolly 小体（脾切除后、巨幼细胞贫血）、Pappenheimer 小体（铁粒幼细胞贫血、地中海贫血）和 Cabot 环（巨幼细胞贫血、骨髓增生异常）。

白细胞形态评估

除了分类计数之外，还记录了白细胞形态特征。有毒颗粒（深色、粗糙的中性粒细胞颗粒）、杜勒小体（淡蓝色细胞质内含物）和空泡表明感染或炎症。中性粒细胞分叶过多（> 5 叶）提示巨幼细胞贫血。 Pelger-Huët 异常（双叶、夹鼻核）是一种良性遗传性疾病，但可能在骨髓增生异常中获得。原始细胞通过高核质比、开放染色质、突出的核仁和嗜碱性细胞质来识别，它们的存在引发了流式细胞术的进一步研究。非典型淋巴细胞（大而丰富的嗜碱性细胞质，锯齿状细胞核）是 EBV 感染的特征。

血小板估计和形态学

通过计算 10 个油浸区域中的血小板并乘以 15–20 × 10⁹/L，根据涂片估算血小板计数。这提供了自动计数的快速检查。注意到巨大血小板、灰色血小板（缺乏颗粒）或血小板团块。巨血栓细胞的存在表明血小板周转率增加，如 ITP 中所示。

报告和关联

PBS 报告应使用标准化术语描述涂片的质量、估计的细胞计数以及所有形态异常。结果与自动 CBC 参数 和临床信息相关。 PBS 通常驱动额外的测试，例如血红蛋白电泳、红细胞酶测定、流式细胞术或细胞遗传学分析。