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髓鞘、神经元和胶质细胞的染色

可视化神经系统的细胞成分需要专门突出显示髓鞘、神经元突起和胶质细胞的染色。这些技术对于诊断脱髓鞘疾病、神经退行性疾病和脑肿瘤至关重要。

髓鞘染色

Luxol Fast Blue(LFB)是髓鞘的标准组织化学染色。铜-酞菁染料与髓鞘的碱性蛋白成分结合,产生蓝绿色。LFB用于评估髓鞘形成模式(正常与脑白质营养不良中的髓鞘形成不足)、脱髓鞘(多发性硬化斑块——边界清晰的髓鞘缺失区域,轴突相对保留)和白质病理学(水肿、梗死、脑白质病)。LFB通常与H&E或PAS结合以显示细胞细节。

Solochrome cyanine是一种快速髓鞘染色,在10-15分钟内产生蓝黑色髓鞘染色。用于冰冻切片和髓鞘形成的快速评估。

髓鞘碱性蛋白(MBP)IHC检测髓鞘的MBP成分。MBP IHC比LFB更敏感,用于检测早期脱髓鞘和残留的髓鞘碎片。用于确认多发性硬化活检中的脱髓鞘以及识别神经鞘肿瘤中的中枢髓鞘。

神经元染色

甲酚紫(CV)——一种尼氏染色,与神经元胞质中的核糖体RNA结合,产生紫色的尼氏体。CV显示神经元密度、尼氏模式(尼氏体丢失——染色质溶解——提示轴突损伤)和核形态。经典的LFB-CV组合在同一张切片上染色髓鞘(蓝色)和神经元(紫色)。

Bielschowsky银浸渍——一种还原银法,将神经原纤维(细胞内)和神经炎性突起(轴突和树突)染成黑色,背景为浅棕色。它显示神经原纤维缠结(阿尔茨海默病中细胞内火焰状缠结)、神经炎性斑块(伴有营养不良性神经突的细胞外淀粉样沉积物)、Pick小体(Pick病中圆形胞质内包涵体)和神经毡丝(神经毡中的营养不良性神经突)。

NeuN IHC(神经元核)——成熟神经元的特异性标志物。NeuN是一种在大多数神经元类型中表达的核蛋白(例外包括小脑浦肯野细胞、视网膜感光细胞和下橄榄核神经元)。NeuN染色缺失提示神经元损伤或死亡。

神经丝(NF)IHC——检测轴突细胞骨架。神经丝染色显示轴突球状体(肿胀的、NF阳性的轴突,见于轴突损伤)和torpedoes(小脑变性中肿胀的浦肯野细胞轴突)。NF也用于评估周围神经活检中的轴突密度。

胶质细胞染色

GFAP(胶质纤维酸性蛋白)IHC是星形胶质细胞的定义性标志物。在正常脑中,GFAP以细小的分支突起染色原浆性和纤维性星形胶质细胞。在反应性星形胶质增生(对任何CNS损伤的反应)中,GFAP上调产生细胞体和突起的肥大——“gemistocytic”星形胶质细胞。GFAP也是星形细胞肿瘤(星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、多形性黄色星形细胞瘤)的谱系标志物。

Olig2 IHC——少突胶质细胞及其前体的核标志物。Olig2在少突胶质细胞瘤中表达,是胶质肿瘤的敏感标志物。它也在松果体实质肿瘤的亚群中表达。

Iba1 IHC(离子钙结合衔接分子1)——小胶质细胞特异性标志物,染色静息(分支状)和活化(阿米巴样)小胶质细胞。活化的小胶质细胞在神经退行性疾病(阿尔茨海默病、帕金森病、ALS)、多发性硬化和感染中上调。CD68——巨噬细胞和活化小胶质细胞中的溶酶体标志物,用于评估炎性浸润的程度。

在脱髓鞘疾病中的应用

多发性硬化——LFB在白质中显示边界清晰的、静脉周围的脱髓鞘斑块。神经丝IHC显示斑块内相对的轴突保留。MBP IHC确认髓鞘丢失。CD68 IHC突出显示巨噬细胞/小胶质细胞浸润。GFAP IHC显示斑块边缘的反应性星形胶质增生。

进行性多灶性白质脑病(PML)——JC病毒感染少突胶质细胞引起斑片状脱髓鞘,伴有增大的、病毒感染的少突胶质细胞核。LFB显示髓鞘丢失;SV40 IHC(与JC病毒交叉反应)确认诊断。

脑白质营养不良——髓鞘代谢的先天性错误(异染性脑白质营养不良、肾上腺脑白质营养不良、克拉伯病)在LFB上显示弥漫性髓鞘丢失,特殊染色可识别特定的储存物质。神经病理学染色的质量保证包括已知阳性对照(Bielschowsky用阿尔茨海默病理学脑,LFB用多发性硬化斑块)。