可视化神经系统的细胞成分需要专门的染色来突出髓鞘、神经元过程和神经胶质细胞。这些技术对于诊断脱髓鞘疾病、神经退行性疾病和脑肿瘤至关重要。
髓鞘质染色
Luxol Fast Blue (LFB) 是髓鞘质的标准组织化学染色剂。铜酞菁染料与髓鞘的碱性蛋白质成分结合,产生蓝绿色。 LFB 用于评估髓鞘形成模式(脑白质营养不良中髓鞘形成正常与髓鞘形成不足)、脱髓鞘(多发性硬化斑块 - 界限清楚的髓鞘缺失区域,相对轴突保留)和白质病理学(水肿、梗塞、白质脑病)。 LFB 通常与 H&E 或 PAS 结合使用以获取细胞细节。
Solochromeyanine 是一种快速髓磷脂染色剂,可在 10-15 分钟内产生蓝黑色髓磷脂染色。它用于冷冻切片和髓鞘形成的快速评估。
髓鞘碱性蛋白 (MBP) IHC 可检测髓鞘的 MBP 成分。 MBP IHC 在检测早期脱髓鞘和残留髓鞘碎片方面比 LFB 更敏感。它用于确认多发性硬化症活检中的脱髓鞘并识别神经鞘肿瘤中的中央髓磷脂。
神经元染色
甲酚紫 (CV): 一种尼氏染色剂,可与神经元细胞质中的核糖体 RNA 结合,产生紫色尼氏物质。 CV 显示神经元密度、尼氏模式(尼氏物质损失 - 色谱溶解 - 表明轴突损伤)和核形态。经典的 LFB-CV 组合 对同一切片中的髓磷脂(蓝色)和神经元(紫色)进行染色。
Bielschowsky 银浸渍: 一种还原银方法,可将神经原纤维(细胞内)和神经突(轴突和树突)染成黑色,形成浅棕色背景。它展示了神经原纤维缠结(阿尔茨海默病中的细胞内火焰状缠结),神经炎斑(具有营养不良性神经突的淀粉样蛋白的细胞外沉积物),Pick 体(Pick 病中的圆形胞浆内包涵体)和神经纤维线(神经纤维中的营养不良性神经突)。
NeuN IHC(神经元核),成熟神经元的特定标记。 NeuN 是一种在大多数神经元类型中表达的核蛋白(例外包括小脑浦肯野细胞、视网膜感光细胞和下橄榄神经元)。 NeuN 染色缺失表明神经元损伤或死亡。
神经丝 (NF) IHC: 检测轴突细胞骨架。神经丝染色显示轴突球体(轴突损伤中肿胀的 NF 阳性轴突)和 鱼雷(小脑变性中肿胀的浦肯野细胞轴突)。 NF 还用于评估周围神经活检中的轴突密度。
胶质染色
GFAP(胶质纤维酸性蛋白)IHC 是星形胶质细胞的定义标记。在正常大脑中,GFAP 对具有细小分支突起的原生质和纤维星形胶质细胞进行染色。在反应性星形胶质细胞增生(对任何中枢神经系统损伤的反应)中,GFAP 上调会导致细胞体和过程肥大,“双生细胞”星形胶质细胞。 GFAP 也是星形细胞肿瘤(星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、多形性黄色星形细胞瘤)的谱系标记。
Olig2 IHC: 少突胶质细胞及其前体的核标记物。 Olig2 在少突胶质细胞瘤中表达,是神经胶质肿瘤的敏感标志物。它也在松果体实质肿瘤的子集中表达。
Iba1 IHC(离子钙结合接头分子 1),一种小胶质细胞特异性标记物,可对静止(分支)和激活(变形虫)小胶质细胞进行染色。激活的小胶质细胞在神经退行性疾病(阿尔茨海默病、帕金森病、ALS)、多发性硬化症和感染中表达上调。 CD68: 巨噬细胞和激活的小胶质细胞中的溶酶体标记物,用于评估炎症浸润的程度。
在脱髓鞘疾病中的应用
多发性硬化症: LFB 显示白质中界限清楚的静脉周围脱髓鞘斑块。神经丝 IHC 显示斑块内相对轴突保存。 MBP IHC 证实髓鞘质丢失。 CD68 IHC 突出显示巨噬细胞/小胶质细胞浸润。 GFAP IHC 显示斑块边缘有反应性星形胶质细胞增生。
进行性多灶性白质脑病 (PML): 少突胶质细胞的 JC 病毒感染导致斑片状脱髓鞘,并伴病毒感染的少突胶质细胞核增大。 LFB显示髓磷脂丢失; SV40 IHC(与 JC 病毒交叉反应)证实了诊断。
脑白质营养不良: 髓磷脂代谢的先天性缺陷(异染性脑白质营养不良、肾上腺脑白质营养不良、克拉伯病)显示 LFB 上存在弥漫性髓磷脂丢失,并具有通过特殊染色识别的特定存储材料。神经病理学染色的质量保证 包括已知的阳性对照(Bielschowsky 的大脑患有阿尔茨海默病,LFB 的多发性硬化斑块)。