Diferensial sel darah putih (WBC) menghitung jumlah relatif dan absolut dari lima jenis leukosit utama — neutrofil, limfosit, monosit, eosinofil, dan basofil. Ini adalah komponen inti dari hitung darah lengkap dan memberikan informasi diagnostik penting tentang kondisi infeksi, inflamasi, alergi, dan neoplastik.

Diferensial Otomatis

Alat analisa hematologi modern menyediakan diferensial lima bagian otomatis menggunakan sitometri aliran dengan label fluoresensi. Sel diklasifikasikan berdasarkan ukuran (hamburan ke depan), kompleksitas internal (hamburan samping), dan kandungan asam nukleat (fluoresensi). Diferensial otomatis sangat akurat untuk sampel normal tetapi mungkin salah mengklasifikasikan sel abnormal, ledakan, atau granulosit yang belum matang. Pedoman laboratorium menetapkan kriteria untuk tinjauan apusan manual: tanda abnormal dari alat analisa, hasil abnormal pertama kali, sampel pediatrik dengan dugaan penyakit hematologi, dan hasil di luar ambang batas yang ditentukan. Apusan darah tepi adalah standar emas untuk konfirmasi.

Neutrofil

Neutrofil tersegmentasi (leukosit polimorfonuklear, PMN) adalah jenis WBC yang paling melimpah, mewakili 40–75% leukosit (hitungan absolut 2,0–7,5 × 10⁹/L). Mereka adalah sel efektor utama dari sistem kekebalan bawaan, yang melakukan fagositosis dan membunuh bakteri dan jamur. Jumlah neutrofil absolut (ANC) dihitung sebagai total WBC × (% neutrofil + % pita). Neutropenia (ANC <1,5 × 10⁹/L) meningkatkan risiko infeksi; neutropenia berat (ANC <0,5 × 10⁹/L) memiliki risiko tinggi infeksi yang mengancam jiwa. Neutrofilia terjadi pada infeksi bakteri, peradangan, nekrosis jaringan, kortikosteroid, neoplasma mieloproliferatif, dan stres fisiologis. Pergeseran ke kiri – peningkatan bentuk pita dan neutrofil yang belum matang – menunjukkan infeksi bakteri akut atau endotoksemia. Granulasi toksik, badan Döhle, dan vakuolasi sitoplasma merupakan tanda morfologi infeksi berat.

Limfosit

Limfosit membentuk 20–50% leukosit (jumlah absolut 1,0–4,0 × 10⁹/L) dan memediasi imunitas adaptif. Mereka termasuk sel T (imunitas yang diperantarai sel), sel B (produksi antibodi), dan sel pembunuh alami (NK) (sitotoksisitas bawaan). Limfositosis terlihat pada infeksi virus (EBV, CMV, influenza, HIV), pertusis, beberapa infeksi bakteri, dan leukemia limfositik kronis. Limfopenia terjadi pada stres akut (demarginasi yang dimediasi katekolamin), terapi kortikosteroid, HIV/AIDS, kemoterapi, radiasi, dan sindrom imunodefisiensi. Limfosit reaktif (atipikal) adalah sel besar dengan sitoplasma basofilik yang melimpah dan inti tidak beraturan, yang khas terlihat pada mononukleosis menular (EBV) dan infeksi virus lainnya.

Monosit

Monosit membentuk 2–10% leukosit (jumlah absolut 0,2–1,0 × 10⁹/L). Mereka bersirkulasi sebentar sebelum bermigrasi ke jaringan dan berdiferensiasi menjadi makrofag dan sel dendritik, memainkan peran penting dalam presentasi antigen, fagositosis, dan produksi sitokin. Monositosis terjadi pada infeksi kronis (tuberkulosis, endokarditis bakterial subakut, infeksi jamur), penyakit autoimun (sarkoidosis, rheumatoid arthritis), keganasan hematologi (CMML, AML-M4/M5), dan selama pemulihan dari kemoterapi (marrow rebound). Monositopenia lebih jarang terjadi dan dapat terlihat pada leukemia sel rambut dan setelah terapi kortikosteroid.

Eosinofil

Eosinofil mewakili 1–6% leukosit (jumlah absolut 0,02–0,5 × 10⁹/L). Mereka terlibat dalam pertahanan melawan parasit cacing dan memodulasi peradangan alergi melalui pelepasan protein granula sitotoksik (protein dasar utama, eosinofil peroksidase). Eosinofilia diklasifikasikan menjadi ringan (0,5–1,5 × 10⁹/L), sedang (1,5–5,0 × 10⁹/L), atau parah (> 5,0 × 10⁹/L). Penyebab umumnya antara lain kelainan alergi (asma, dermatitis atopik, hipersensitivitas obat), infeksi parasit (terutama cacing), keganasan tertentu (limfoma Hodgkin, leukemia eosinofilik), dan sindrom hipereosinofilik idiopatik. Eosinopenia terjadi pada stres akut, terapi kortikosteroid, dan beberapa infeksi akut.

Basofil

Basofil adalah leukosit yang paling sedikit jumlahnya yaitu 0–1% (jumlah absolut 0–0,1 × 10⁹/L). Mereka mengandung butiran histamin dan heparin dan berpartisipasi dalam reaksi hipersensitivitas langsung dan respons alergi yang dimediasi IgE. Basofilia jarang terjadi tetapi dapat terlihat pada CML (seringkali dengan peningkatan jumlah basofil), neoplasma mieloproliferatif, kolitis ulserativa, dan setelah splenektomi. Basopenia sulit dideteksi pada jumlah yang rendah dan tidak signifikan secara klinis.

Hasil yang Ditandai dan Pengujian Refleks

Ketika alat analisa menandai kelainan – seperti ledakan, granulosit yang belum matang, sel darah merah berinti, atau limfosit atipikal – protokol laboratorium memerlukan diferensial manual oleh personel terlatih. Pengujian refleks tambahan mungkin mencakup flow cytometry untuk immunophenotyping (dugaan leukemia/limfoma), sitokimia (MPO, Sudan black B, NSE untuk subklasifikasi AML), dan analisis sitogenetik/molekuler untuk diagnosis pasti.