DNA分离是一种从生物样本中提取DNA的技术，然后可用于遗传分析和克隆。这是许多生物实验的关键步骤，例如 PCR 和克隆。
如何分离 DNA
该过程依赖于一系列化学和物理步骤来打破细胞膜，同时保持脆弱的 DNA 链完整。
- 裂解
第一步是打开细胞。这是使用裂解缓冲液来完成的，裂解缓冲液通常含有用于溶解脂肪细胞膜的去污剂（如 SDS）和用于分解保持 DNA 紧密卷曲的蛋白质的酶（如蛋白酶 K）。在某些情况下，机械力（例如在液氮中研磨样品）用于粉碎坚韧的细胞壁。
- 蛋白质去除和纯化
一旦细胞破裂，就会留下“裂解物”——一团由 DNA、RNA、蛋白质和脂质组成的混乱汤。为了分离 DNA，科学家经常添加浓盐或有机溶剂（如苯酚-氯仿）。这导致蛋白质聚集在一起并下沉，而 DNA 仍然溶解在液体层中。样品在离心机中旋转，将重的碎片压到底部，将富含 DNA 的液体留在顶部。
3、降水
DNA可溶于水，但不溶于酒精。通过添加冰冷的乙醇或异丙醇，DNA 分子被迫聚集在一起并变得肉眼可见。它通常看起来像细的白色鼻涕状线或管底部的白色小颗粒。
- 洗涤和重悬
DNA 沉淀用 70% 乙醇洗涤，以去除任何残留的盐或污染物。最后，蒸发酒精，将纯化的 DNA 重新溶解（重悬）于 TE 缓冲液 (Tris-EDTA) 或无核酸酶水中。这种“纯金”现在可以在冰箱中保存数年或立即用于实验。
