真菌培养

真菌是导致人类疾病、食品腐败和环境污染的重要原因。它们的培养需要特定的培养基和培养条件。

**沙保弱葡萄糖琼脂（SDA）**是真菌分离的标准培养基。其低 pH（5.6）抑制细菌生长。常添加氯霉素或庆大霉素以抑制残留细菌污染。抑制性霉菌琼脂是临床标本的替代选择。

环境真菌在 25–30 °C 下培养，病原真菌在 35–37 °C 下培养。平板在报告为阴性前需保持最多 4 周。酵母通常在 24–48 小时内生长。

鉴定基于：

• 菌落形态：质地、色素、生长速率、背面颜色。
• 显微镜形态：菌丝类型、分生孢子梗结构、孢子形状和排列。乳酸酚棉蓝封片是从菌落观察真菌结构的标准制备方法。
• 酵母生化检测：碳源同化、芽管试验。

酵母培养：大多数酵母在标准细菌培养基和 SDA 上均能生长。白念珠菌的芽管试验包括在 37 °C 下将菌落在血清中孵育 2–4 小时，在显微镜下检查菌丝长出。

厌氧培养

厌氧细菌被氧气杀死或抑制。它们的培养需要在处理和培养的整个过程中保持无氧条件。

标本采集：厌氧获取标本。避免将样品暴露于空气。30 分钟内送至实验室。

厌氧培养基：

• 预还原厌氧灭菌培养基：在无氧气体中煮沸和储存。
• 布鲁氏菌血琼脂：含血红素和维生素 K。
• 苯乙醇琼脂：抑制兼性厌氧菌。
• 卡那霉素-万古霉素裂解血琼脂：对拟杆菌和其他革兰阴性厌氧菌有选择性。

厌氧培养：

• 厌氧罐：带有产气袋的密封容器，产生 H₂ 和 CO₂。钯催化剂珠催化 H₂ 与残余 O₂ 反应生成水。指示条在达到厌氧条件时变为无色。
• 厌氧培养箱：带有 85% N₂、10% H₂、5% CO₂ 气氛的密封手套箱。钯催化剂去除微量氧气。允许连续操作而不将培养物暴露于空气。
• GasPak 系统：用于少量平板的自包含一次性包封系统。

在 37 °C 下培养至少 48 小时。厌氧菌通常比需氧菌生长更慢。