抗原-抗体相互作用是适应性免疫应答的基础。抗体结合的高度特异性使免疫系统能够识别和消除病原体,并为广泛的诊断和研究应用提供了基础。
抗体结构
- 免疫球蛋白(Ig)是Y形糖蛋白,由四条多肽链组成:两条相同的重链(50-70 kDa)和两条相同的轻链(25 kDa),通过二硫键连接。
- Fab(抗原结合片段)区包含形成抗原结合位点的可变结构域。高变区(互补决定区,CDRs)决定特异性。
- Fc(可结晶片段)区决定抗体类别并介导效应功能,如调理作用、补体激活和与免疫细胞上Fc受体的结合。
抗体类别
- IgG:血清中最丰富(75%),单体,可穿过胎盘,提供二次免疫应答。
- IgM:五聚体,初次免疫应答中最早产生的抗体,补体激活效率高。
- IgA:在分泌物(唾液、泪液、黏膜)中以二聚体形式存在,提供黏膜免疫。血清中为单体。
- IgE:单体,参与过敏反应和通过肥大细胞脱颗粒防御寄生虫。
- IgD:单体,主要在初始B细胞上作为抗原受体表达。
抗原结合的性质
- 抗体与其相应表位之间的相互作用是非共价的,涉及氢键、静电相互作用、范德华力和疏水效应。
- 结合具有高度特异性:每个抗体识别抗原上独特的表位(通常为5-15个氨基酸或3-5个糖残基)。
- 亲和力描述单个互补位与表位之间的结合强度(Kd通常为10^-7至10^-11 M)。
- 亲合力描述多聚抗体(如IgM因其五聚体结构而具有高亲合力)的整体结合强度。
抗原与表位
- 抗原是能够引发免疫应答的任何分子。大多数抗原是蛋白质或多糖。
- 表位(抗原决定簇)是抗原上被抗体或T细胞受体识别的特定部分。
- 线性表位由连续的氨基酸序列组成;构象表位取决于蛋白质的三维折叠。
沉淀和凝集
- 沉淀:可溶性抗原与抗体在最佳比例(等价区)形成可见的免疫复合物(格子形成)。用于双向免疫扩散和免疫电泳等技术。
- 凝集:颗粒性抗原(细胞、细菌、乳胶珠)被抗体交联,形成可见的团块。用于血型鉴定、细菌血清分型(如沙门氏菌、大肠杆菌)和乳胶凝集试验。
免疫检测技术
- ELISA(酶联免疫吸附测定):使用酶标试剂和显色底物检测抗原或抗体。
- Western印迹:通过电泳分离蛋白质,转移到膜上,使用标记抗体检测特定蛋白。
- 免疫组织化学:使用酶或荧光素标记的抗体在组织切片中定位抗原。
- 流式细胞术:使用荧光标记抗体分析和分选单个细胞。
临床应用
- 通过检测病原体特异性抗体进行感染性疾病(HIV、肝炎、莱姆病)的血清学诊断。
- 自身免疫病中的自身抗体检测(类风湿关节炎的类风湿因子、系统性红斑狼疮的抗核抗体)。
- 通过测量针对疫苗抗原的抗体效价监测疫苗应答。
- 治疗性单克隆抗体用于癌症、自身免疫病和感染性疾病。