结缔组织染色是一组组织化学技术,可将细胞外基质的主要成分(胶原蛋白、弹性纤维、网状蛋白和基底膜)相互区分并与肌肉细胞区分开来。它们对于评估纤维化、血管病理学和基质反应至关重要。
马森的三色
Masson 的三色染料使用三种染料为不同的组织成分着色。 魏格特铁苏木素将细胞核染成黑色。酸性染料(比布里希猩红酸品红)将肌肉和细胞质染成红色。阴离子染料(苯胺蓝或甲基蓝)将胶原蛋白染成蓝色(或绿色,浅绿色SF作为第三种染料)。磷钨酸或磷钼酸的分化控制红色染料的保留量,肌肉保持红色,而胶原蛋白脱色并拾取蓝色复染剂。
应用包括评估肝纤维化(METAVIR 分期、Ishak 评分)、梗死后心肌纤维化、肌肉疾病(营养不良显示肌内膜胶原增加)和肾纤维化(间质纤维化和肾小管萎缩)。该染色还突出显示肾小球基底膜,并有助于识别血管中的纤维蛋白样坏死。
维尔霍夫-范·吉森 (VVG)
VVG 使用 Verhoeff 弹性染色剂(苏木精、氯化铁和碘)将弹性纤维染色为黑色,然后使用 van Gieson 复染剂(酸性品红和苦味酸)将胶原蛋白染成红色,将肌肉染成黄色。弹性纤维在红黄色背景下呈现为黑色、波状、分支纤维。 VVG 用于评估弹性纤维疾病:马凡综合征(主动脉弹性纤维的碎裂和破坏)、肺气肿(肺泡弹性纤维缺失)和动脉硬化(弹性板重复和钙化)。在血管病理学中,VVG 显示内部和外部弹性层,这对于识别肿瘤的血管侵犯和对动脉病变进行分类至关重要。
网状蛋白染色
网状蛋白染色剂(Gordon 和 Sweet 或 Gomori 的银浸渍)将金属银沉积在网状蛋白纤维(III 型胶原蛋白)上,在苍白背景下呈现黑色。网状蛋白形成腺体、血管和平滑肌的支撑框架。在肝脏病理学中,网状蛋白染色突出了肝板结构,正常网状蛋白框架的丧失表明肝硬化;板之间的扩张表明再生结节。在骨髓病理学中,网状蛋白染色对骨髓纤维化进行分级(MF-0 至 MF-3)。在肿瘤病理学中,网状蛋白勾勒出肺泡和腺体结构,有助于对分化不良的肿瘤进行分类。
磷钨酸苏木精 (PTAH)
PTAH 对纤维蛋白、横纹肌交叉条纹、神经胶质纤维和细胞核进行染色。肌肉条纹和纤维蛋白呈蓝色;胶原蛋白和软骨呈棕粉色。 PTAH 用于诊断纤维蛋白样坏死(血管炎)、横纹肌肉瘤(交叉条纹)和阿尔茨海默病(神经原纤维缠结和老年斑)。该染色剂需要仔细的氧化(高锰酸钾)和媒染,技术要求很高。
平滑肌肌动蛋白免疫组织化学
虽然不是组织化学染色,但平滑肌肌动蛋白 (SMA) IHC 已在很大程度上取代了传统的结缔组织染色,用于识别平滑肌细胞和肌成纤维细胞。 SMA 对血管平滑肌、周细胞和肌上皮细胞进行染色。它用于评估肿瘤分化(平滑肌肉瘤)和肌纤维母细胞增殖。
质量控制
每个结缔组织染色都需要一个已知含有目标成分的阳性对照:皮肤或结肠用于三色(胶原),动脉或肺用于 VVG(弹性纤维),肝脏或脾用于网状蛋白,肌肉或纤维蛋白凝块用于 PTAH。每批都运行对照。通过将对照强度与既定标准进行比较来评估染色过度和染色不足。 常见问题排查 包括调整分化时间 (trichrome)、氯化铁浓度 (VVG) 或银溶液温度 (reticulin)。