概述
靶向代谢组学是一种假设驱动的方法,可以高精度、特异性和敏感性地量化一组预定义的代谢物。与旨在全面覆盖的非目标代谢分析不同,目标方法侧重于已知的代谢物(通常属于特定途径或类别),并使用真实的化学标准来实现绝对定量。该方法通常在使用多反应监测 (MRM) 的三重四极杆质谱仪或具有平行反应监测 (PRM) 的高分辨率仪器上实施。当目标代谢物得到良好表征且定量精度至关重要时,靶向代谢组学是首选方法。
方法
内标 - 每个目标代谢物的理想稳定同位素标记类似物 - 以已知浓度添加到每个样品中,以校正基质效应、提取损失和仪器漂移。 在相同生物基质中制备的标准曲线确定了每种代谢物的线性范围和定量限。 MRM 转换 通过直接注入每个标准品来优化,以选择最敏感和最特异的前体片段对。 样品制备根据代谢物类别进行定制:极性代谢物的蛋白质沉淀、脂质的液液萃取或用于靶向富集的固相萃取。使用软件处理数据,该软件集成峰面积、应用校准曲线并使用合并的参考样品执行质量控制评估。
应用程序
靶向代谢组学用于验证非靶向研究中发现的生物标志物,监测通过特定代谢途径(例如[糖酵解](/guides/grinding.html)和柠檬酸循环)的通量,并分析临床队列中的代谢变化。它是临床代谢组学检测的黄金标准,通常与 HPLC 分离和 质谱 检测结合使用,以确保稳健、高通量的定量。 CE-MS 基于[毛细管电泳](/guides/capillary- electrophoresis),是高极性和离子代谢物靶向检测的替代平台。