概述

靶向代谢组学是一种假设驱动的方法，以高准确性、特异性和灵敏度定量预定义的代谢物组。与旨在全面覆盖的非靶向代谢分析不同，靶向方法专注于已知代谢物——通常属于特定通路或类别——并使用真实化学标准实现绝对定量。该方法通常在三重四极杆质谱仪上使用多反应监测（MRM）或在���分辨率仪器上使用平行反应监测（PRM）实施。当目标代谢物已被充分表征且定量精度至关重要时，靶向代谢组学是首选方法。

方法

内标——理想情况下是每个目标代谢物的稳定同位素标记类似物——以已知浓度加入每个样品，以校正基质效应、提取损失和仪器漂移。在相同生物基质中制备的标准曲线确定每种代谢物的线性范围和定量限。通过直接进样每个标准来优化MRM 转换，以选择最灵敏和最特异的前体-碎片对。样品制备针对代谢物类别进行调整：极性代谢物用蛋白沉淀，脂质用液-液萃取，或靶向富集用固相萃取。数据通过集成峰面积、应用校准曲线和执行质控评估（使用合并参考样品）的软件进行处理。

应用

靶向代谢组学用于验证在非靶向研究中发现的生物标志物，监测特定代谢通路（如糖酵解和柠檬酸循环）中的通量，以及分析临床队列中的代谢变化。它是临床代谢组学分析的金标准，通常与 HPLC 分离和质谱检测相结合，以确保稳健、高通量的定量。