方法验证是证明分析方法对其预期应用可靠的执行的记录过程。 ICH、USP、FDA 和 ISO 等监管机构要求对药物放行测试、临床诊断、环境合规性和食品安全中使用的方法进行验证。验证可确保该方法在定义的验收标准内生成可靠、可重复的数据。

准确度（真实度）衡量测量值与真实值的接近程度，并通过加标回收实验、有证参考物质 (CRM) 分析或与参考方法比较进行评估。 精度描述重复测量的接近程度，并表示为相对标准偏差 (%RSD)。 重复性（批内精度）是通过在同一天相同条件下分析重复数据获得的。 再现性（实验室间精度）评估不同实验室、分析人员和仪器的性能。中等精度将这两个不同的因素联系起来，例如单个实验室内的日期、分析人员或仪器。

特异性（选择性）表明该方法在存在干扰物（基质成分、降解产物或相关物质）的情况下明确测量分析物。对于色谱方法，特异性通过所有峰的基线分辨率来显示。 检测限 (LOD) 和 定量限 (LOQ) 定义了方法的低浓度能力。 LOD 是最小的可检测信号（通常 S/N ≥ 3 或 3.3σ/S），而 LOQ 是可以以可接受的准确度和精确度进行量化的最低浓度（S/N ≥ 10 或 10σ/S）。

线性 是指该方法在给定范围内产生与分析物浓度成比例的测试结果的能力，通过相关系数（r² ≥ 0.995 或 0.999）、y 截距和残差分析来证明。 范围是浓度上限和浓度下限之间的间隔，在此范围内，该方法已表现出可接受的线性、准确度和精密度。 稳健性衡量方法对 pH、温度、流速或进样体积等参数故意变化的抵抗力。 耐用性（现在通常合并为鲁棒性）在历史上是指不同操作条件下的再现性。

系统适用性测试 (SST) 在每次分析运行之前和期间进行，以验证仪器和方法的性能是否可接受。 SST 参数包括分辨率、拖尾因子、理论板数和重复进样精度。正式的验证协议预先指定实验、验收标准和统计方法。最终验证报告记录了所有结果、偏差以及该方法的预期范围和限制的声明。完全验证的方法为所有受监管行业的可靠分析数据奠定了基础。