方法验证是证明分析方法在其预期应用中可靠执行的记录过程。ICH、USP、FDA和ISO等监管机构要求对用于药品放行测试、临床诊断、环境合规和食品安全的分析方法进行验证。验证确保该方法在定义的接受标准内产生可辩护、可重复的数据。

准确度（真实性）衡量测量值与真实值的接近程度，通过加标回收实验、有证标准物质（CRM）分析或与参考方法比较来评估。精密度描述重复测量值的接近程度，以相对标准偏差（%RSD）表示。重复性（批内精密度）通过在相同条件下同一天内分析 replicates 获得。再现性（实验室间精密度）评估不同实验室、分析人员和仪器间的性能。中间精密度介于两者之间，在单个实验室内变化如日期、分析人员或仪器等因素。

专属性（选择性）证明该方法在存在干扰物——基体组分、降解产物或相关物质——时能够明确测量分析物。对于色谱方法，专属性通过所有峰的基线分离来证明。**检测限（LOD）和定量限（LOQ）**定义了方法的低浓度能力。LOD是可检测的最小信号（通常信噪比≥3或3.3σ/S），而LOQ是可以以可接受的准确度和精密度定量的最低浓度（信噪比≥10或10σ/S）。

线性是方法在给定范围内产生与分析物浓度成比例的测试结果的能力，通过相关系数（r² ≥ 0.995或0.999）、y截距和残差分析来证明。范围是方法已证明具有可接受的线性、准确度和精密度的上浓度和下浓度之间的区间。稳健性衡量方法对pH、温度、流速或进样体积等参数有意变化的抵抗能力。耐用性（现在常并入稳健性）历史上指不同操作条件下的再现性。

**系统适用性测试（SST）**在每个分析运行之前和期间进行，以验证仪器和方法性能可接受。SST参数包括分离度、拖尾因子、理论塔板数和重复进样精密度。正式验证方案预先指定实验、接受标准和统计方法。最终验证报告记录所有结果、偏差以及方法预期范围和局限性的说明。完全验证的方法为所有受监管行业的可靠分析数据奠定了基础。