在多种疾病中，淀粉样蛋白、色素和矿物质沉积物在组织中积聚。它们的组织化学鉴定提供了通常无法通过任何其他技术进行的特定诊断。

刚果红用于淀粉样蛋白

刚果红是淀粉样蛋白的标准组织化学染色剂。在碱性溶液中，刚果红通过相邻 β 链之间的插入与淀粉样原纤维的 β 折叠片结构结合。在明视野显微镜下，淀粉样蛋白沉积物被染成橙红色到红色。诊断结果是交叉偏振器下的苹果绿双折射，这是刚果红分子沿着淀粉样原纤维排列的结果，淀粉样原纤维本身排列成高度有序的双折射阵列。

单独使用刚果红无法区分淀粉样蛋白类型（AL、AA、ATTR、Aβ 等），淀粉样蛋白亚型的 IHC（kappa 和 lambda 轻链、血清淀粉样蛋白 A、运甲状腺素蛋白、β-淀粉样蛋白）或需要进行质谱分析来进行分型。刚果红对于大型矿床的敏感性很高，但可能会错过早期或小型矿床 - 在极化下检查多个部分。假阳性刚果红结合可能发生在弹性纤维、胶原蛋白和透明蛋白中，只有苹果绿双折射才能证实淀粉样蛋白。

硫黄素 T

硫磺素 T 是一种荧光染料，可结合淀粉样蛋白，并显示出增强的荧光和特征发射位移。它在检测小淀粉样蛋白沉积物方面比刚果红更敏感，但需要荧光显微镜并且特异性较差。刚果红仍然是淀粉样蛋白诊断的金标准。

Perls 的铁普鲁士蓝

Perls 的普鲁士蓝可检测组织切片中的三价铁 (Fe3+)。切片用盐酸和亚铁氰化钾处理；三价铁离子与亚铁氰化物反应生成不溶性的普鲁士蓝（亚铁氰化铁）。该反应在铁位点产生蓝色沉淀。背景通常用核固红复染。

Perls 染色可识别铁过载情况下的含铁血黄素（聚集铁蛋白）：遗传性血色素沉着症（肝细胞铁）、输血相关的铁质沉着症、酒精性肝病和溶血性贫血。在骨髓中，Perls 对可染色的铁进行了分级（0-6 级）。在肺部，Perls 证明了肺充血中存在心力衰竭细胞（富含含铁血黄素的巨噬细胞），并证实了肺含铁血黄素沉着症。在脾脏和淋巴结中，出血或梗塞后的铁沉积很容易识别。

Von Kossa 钙

Von Kossa 染色剂通过用银离子代替不溶性钙盐（磷酸盐、碳酸盐）中的钙来检测钙沉积物。在紫外线或强光照射下，银还原成金属银，呈黑色或棕色。背景用核固红或范吉森复染。

Von Kossa 用于证明病理性钙化：坏死组织、肿瘤（脑膜瘤中的砂粒体、甲状腺乳头状癌、浆液性卵巢癌）中的营养不良性钙化、钙化的心脏瓣膜和钙化性肌腱炎。它还可以识别肾、肺和胃粘膜中的转移性钙化（由于高钙血症导致正常组织中的钙沉积）。 Von Kossa 无法检测草酸钙 ， 对于草酸盐，请使用 pH 4.0 的茜素红 S 或偏振光（草酸盐晶体具有双折射）。

茜素红 S 钙

茜素红 S 在碱性 pH (4.0-4.5) 下与钙离子形成橙红色沉淀。它对钙的特异性比 Von Kossa 更高，可检测磷酸钙和草酸钙。茜素红用于识别软组织中的钙沉积、血管钙化和肾钙质沉着症。它也是识别骨骼和牙齿组织学切片中钙的标准染色剂。

胆红素和胆汁染色

富谢染色（三氯乙酸和氯化铁）将胆红素氧化为绿色胆绿素，然后将绿色/蓝色氧化为胆汁的翠绿色。它用于识别肝活检中的肝内和肝外胆汁淤积以及胆管中的胆汁血栓。 霍尔染色（Van Gieson 和 Fouchet 染色）同时对胆汁（绿色/蓝色）和胶原蛋白（红色）进行染色。胆汁色素必须与脂褐质（老年色素）和含铁血黄素区分开来 ， Perls 染色为铁蓝色，而 PAS 则不同程度地染色脂褐质。

黑色素漂白剂

黑色素是一种内源性棕黑色色素，可能会掩盖细胞细节和 IHC 解释。 黑色素漂白剂（高锰酸钾，然后草酸）可去除黑色素，而不损害组织形态或抗原性，从而可以评估大量黑色素沉积物下方的细胞细节。方案优化后，漂白切片可用于 IHC。

质量控制

每种特殊染色都需要同时运行适当的阳性对照：含淀粉样蛋白的组织（刚果红）、铁超载的肝脏（Perls’）、钙化动脉（Von Kossa）和胆汁染色的肝脏（Fouchet’s）。控制失败使运行无效。 标准故障排除程序 适用 - 如果对照较弱，请检查试剂新鲜度、pH 值和孵育时间。