La prueba de susceptibilidad antimicrobiana determina la efectividad de los agentes antimicrobianos contra los microorganismos. Más allá de la difusión en disco y la dilución en caldo estándar, los métodos avanzados proporcionan información mecanicista sobre la resistencia y permiten una terapia dirigida.
Los sistemas automatizados como VITEK y BD Phoenix utilizan microdilución en caldo miniaturizada en tarjetas multipocillo con detección colorimétrica o turbidimétrica. Los resultados están disponibles en 4 a 12 horas con valores de CMI para un panel antimicrobiano completo. Estos sistemas integran reglas experto para la detección de mecanismos de resistencia.
El Etest utiliza una tira de plástico con un gradiente antimicrobiano predefinido. Combina la conveniencia de la difusión en disco con la CMI cuantitativa de los métodos de dilución. La intersección de la elipse de inhibición con la tira revela la CMI. El Etest es útil para organismos fastidiosos y cuando se necesitan valores de CMI individuales para fármacos específicos.
La detección de carbapenemasas se ha vuelto crítica para el control de infecciones. El método modificado de inactivación de carbapenémicos detecta la producción de carbapenemasa en Enterobacteriaceae, Pseudomonas y Acinetobacter. La prueba Carba NP detecta la hidrólisis de carbapenémicos colorimétricamente. Las pruebas moleculares, incluyendo PCR y micromatrices, detectan genes de carbapenemasa incluyendo variantes de KPC, NDM, VIM, IMP y OXA.
La confirmación de betalactamasas de espectro extendido utiliza la inhibición sinérgica por ácido clavulánico. Las pruebas de disco combinado con y sin inhibidor confirman la producción de BLEE. La detección de betalactamasa AmpC utiliza inhibición con ácido borónico o cloxacilina.
La resistencia a meticilina en estafilococos se detecta mediante difusión en disco con cefoxitina o aglutinación de látex PBP2a. La resistencia a vancomicina en enterococos se confirma mediante PCR vanA/vanB. Los fenotipos de resistencia a macrólidos-lincosamidas-estreptograminas se diferencian mediante la prueba de la zona D.
Los métodos genotípicos, incluyendo la secuenciación del genoma completo, proporcionan un perfil completo de genes de resistencia. La secuenciación de próxima generación detecta determinantes de resistencia conocidos y nuevos, marcadores de tipificación y genes de virulencia directamente de muestras clínicas o aislados.
Los criterios interpretativos siguen las guías CLSI o EUCAST. La elección de los puntos de corte afecta la categorización clínica. Los valores de corte epidemiológicos distinguen las poblaciones silvestres de las no silvestres independientemente del resultado clínico.