El análisis fitoquímico implica la extracción, separación y caracterización sistemática de compuestos bioactivos de material vegetal. Los metabolitos secundarios vegetales incluyen alcaloides, flavonoides, terpenoides, ácidos fenólicos, saponinas y taninos, muchos de los cuales tienen aplicaciones farmacéuticas, nutricionales e industriales.

La extracción es el primer paso crítico. La maceración implica remojar el material vegetal en polvo en un disolvente a temperatura ambiente con agitación ocasional. La percolación utiliza un flujo continuo de disolvente a través del material vegetal. La extracción Soxhlet hace circular disolvente caliente a través de la muestra para una extracción exhaustiva. La extracción asistida por ultrasonidos utiliza cavitación para romper las paredes celulares y mejorar la transferencia de masa. La extracción con fluidos supercríticos usando CO2 proporciona una extracción selectiva y libre de disolventes de compuestos no polares.

La selección del disolvente sigue principios de como-disuelve-como. El hexano y el diclorometano extraen compuestos no polares como ceras y aceites esenciales. El etanol y el metanol extraen compuestos de polaridad media, incluyendo flavonoides y alcaloides. El agua extrae compuestos polares como taninos y glucósidos. La extracción secuencial con disolventes de polaridad creciente fracciona el extracto por clase de compuesto.

El cribado fitoquímico utiliza reacciones de color cualitativas para detectar clases de compuestos. La prueba de Dragendorff detecta alcaloides. La prueba de Shinoda detecta flavonoides. La prueba de Liebermann-Burchard detecta terpenoides y esteroles. La prueba de cloruro férrico detecta compuestos fenólicos. Estas pruebas proporcionan información preliminar sobre la composición química.

El análisis cuantitativo determina la concentración de fitoquímicos específicos. El contenido fenólico total se mide mediante el método de Folin-Ciocalteu con equivalentes de ácido gálico. El contenido total de flavonoides utiliza el método colorimétrico del cloruro de aluminio. La cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) cespectrometría de masasriz de diodos o espectrometría de masas cromatografía de gasesindividuales. La cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS) se utiliza para compuestos volátiles.

La elucidación estructural de compuestos purificados utiliza espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN), espectrometría de masas, espectroscopia infrarroja y cristalografía de rayos X. La desreplicación mediante HPLC-MS y búsqueda en bases de datos identifica compuestos conocidos y enfoca los esfuerzos en estructuras novedosas.