Las tinciones de tejido conectivo son un grupo de técnicas histoquímicas que distinguen los componentes principales de la matriz extracelular (colágeno, fibras elásticas, reticulina y membrana basal) entre sí y de las células musculares. Son esenciales para evaluar la fibrosis, la patología vascular y las reacciones estromales.
Tricromo de Masson
El tricrómico de Masson utiliza tres tintes para colorear diferentes componentes del tejido. La hematoxilina férrica de Weigert tiñe los núcleos de negro. Un tinte ácido (fucsina ácida escarlata de Biebrich) tiñe de rojo el músculo y el citoplasma. Un tinte aniónico (azul de anilina o azul de metilo) tiñe el colágeno de azul (o verde, con SF verde claro como tercer tinte). La diferenciación entre ácido fosfotúngstico o fosfomolíbdico controla la cantidad de tinte rojo que se retiene: el músculo permanece rojo, mientras que el colágeno se decolora y adquiere la contratinción azul.
Las aplicaciones incluyen la evaluación de la fibrosis hepática (estadio METAVIR, puntuación de Ishak), fibrosis miocárdica después de un infarto, enfermedades musculares (las distrofias muestran un aumento del colágeno endomisial) y fibrosis renal (fibrosis intersticial y atrofia tubular). La tinción también resalta las membranas basales glomerulares y ayuda a identificar la necrosis fibrinoide en los vasos.
Verhoeff-van Gieson (VVG)
VVG tiñe las fibras elásticas de negro utilizando el tinte elástico de Verhoeff (hematoxilina, cloruro férrico y yodo), seguido de una contratinción de Van Gieson (fucsina ácida y ácido pícrico) que colorea el colágeno de rojo y el músculo de amarillo. Las fibras elásticas aparecen como fibras negras, onduladas y ramificadas sobre un fondo rojo-amarillo. VVG se utiliza para evaluar trastornos de las fibras elásticas: síndrome de Marfan (fragmentación y rotura de las fibras elásticas aórticas), enfisema (pérdida de fibras elásticas alveolares) y arteriosclerosis (duplicación y calcificación de la lámina elástica). En patología vascular, VVG demuestra las láminas elásticas internas y externas, esenciales para identificar la invasión vascular por tumores y clasificar las lesiones arteriales.
Mancha de reticulina
Las tinciones de reticulina (impregnación de plata de Gordon y Sweet o Gomori) depositan plata metálica sobre las fibras de reticulina (colágeno tipo III), que aparecen negras sobre un fondo pálido. La reticulina forma la estructura de soporte de glándulas, vasos sanguíneos y músculo liso. En patología hepática, las tinciones de reticulina resaltan la arquitectura de la placa hepática: la pérdida de la estructura normal de reticulina indica cirrosis; la expansión entre placas indica nódulos regenerativos. En patología de la médula ósea, la tinción con reticulina clasifica la mielofibrosis (MF-0 a MF-3). En patología tumoral, la reticulina perfila las estructuras alveolares y glandulares, lo que ayuda a clasificar tumores poco diferenciados.
Hematoxilina del ácido fosfotúngstico (PTAH)
La PTAH tiñe la fibrina, las estrías cruzadas del músculo estriado, las fibras gliales y los núcleos. Las estrías musculares y la fibrina aparecen de color azul; El colágeno y el cartílago aparecen de color rosa pardusco. La PTAH se utiliza para diagnosticar necrosis fibrinoide (vasculitis), rabdomiosarcoma (estrías cruzadas) y enfermedad de Alzheimer (ovillos neurofibrilares y placas seniles). El tinte requiere una oxidación cuidadosa (permanganato de potasio) y un mordiente y es técnicamente exigente.
Inmunohistoquímica de actina del músculo liso
Si bien no es una tinción histoquímica, la actina del músculo liso (SMA) IHC ha reemplazado en gran medida las tinciones tradicionales del tejido conectivo para identificar células del músculo liso y miofibroblastos. La AME tiñe el músculo liso vascular, los pericitos y las células mioepiteliales. Se utiliza para evaluar la diferenciación tumoral (leiomiosarcoma) y proliferaciones miofibroblásticas.
Control de calidad
Cada tinción de tejido conectivo requiere un control positivo que se sabe que contiene el componente objetivo: piel o colon para tricrómico (colágeno), arteria o pulmón para VVG (fibras elásticas), hígado o bazo para reticulina y coágulo de músculo o fibrina para PTAH. Los controles se realizan con cada lote. La tinción excesiva y la tinción insuficiente se evalúan comparando la intensidad del control con las normas establecidas. La solución de problemas comunes incluye ajustar el tiempo de diferenciación (tricrómico), la concentración de cloruro férrico (VVG) o la temperatura de la solución de plata (reticulina).
