La sección congelada es un método de diagnóstico rápido de tejidos que se realiza mientras el paciente está bajo anestesia. Omite el ciclo estándar de procesamiento de tejidos de 12 a 24 horas al congelar el tejido, cortar secciones en un criostato, teñirlas y hacer que el patólogo informe dentro de 15 a 20 minutos. El resultado influye directamente en el procedimiento quirúrgico: determina si los márgenes están limpios, si un ganglio linfático contiene un tumor o si se ha obtenido suficiente tejido de diagnóstico.
El criostato
El criostato es un microtomo rotatorio encerrado en un gabinete refrigerado que se mantiene entre -20 y -30°C. El tejido fresco y sin fijar se coloca en un portabrocas de metal con medio de inclusión (compuesto OCT: temperatura de corte óptima), se congela rápidamente sumergiendo el portabrocas en nitrógeno líquido o colocándolo en una barra de congelación rápida y luego se secciona con un espesor de 4 a 10 µm. La sección se coloca en un portaobjetos de vidrio a temperatura ambiente, lo que fija instantáneamente el tejido al derretir la sección congelada sobre el vidrio.
Indicaciones para la sección congelada
Evaluación de márgenes es la indicación más común. En la cirugía del cáncer, el cirujano necesita saber si el margen de resección está libre de tumor. Si la sección congelada muestra un tumor en el margen, el cirujano puede resecar tejido adicional inmediatamente, evitando una segunda operación.
La evaluación de los ganglios linfáticos para la biopsia del ganglio linfático centinela en melanoma y cáncer de mama determina si el tumor ha hecho metástasis, lo que orienta la extensión de la disección de los ganglios linfáticos.
La identificación del tejido garantiza que la muestra contenga tejido de diagnóstico, lo que es particularmente importante para el adenoma de paratiroides (para distinguirlo de la tiroides, los ganglios linfáticos o la grasa), la identificación de los nervios durante la microcirugía y la confirmación de que se ha obtenido tejido de una lesión profunda para secciones permanentes.
La clasificación de lesiones desconocidas puede guiar el abordaje quirúrgico inmediato: distinguir procesos inflamatorios de neoplásicos y, dentro de las neoplasias, diferenciar benignos de malignos.
Técnica y tinción
Las secciones congeladas generalmente se tiñen con un protocolo rápido de H&E: hematoxilina durante 30 a 60 segundos, seguida de eosina durante 15 a 30 segundos, con breves pasos de deshidratación y limpieza. Todo el ciclo de tinción dura entre 2 y 3 minutos. Algunos laboratorios también utilizan azul de toluidina (para mastocitos y fibras nerviosas) o azul de metileno (para identificación de paratiroides).
Calidad y limitaciones
La calidad de las secciones congeladas es inherentemente inferior a la de las secciones permanentes (parafina). El proceso de congelación crea artefactos de cristales de hielo que alteran la estructura celular, haciendo que los detalles nucleares sean más toscos y menos nítidos. El espesor de la sección es mayor (6-10 µm frente a 3-5 µm para parafina), lo que reduce la resolución óptica. El tejido adiposo y las muestras muy calcificadas se seccionan mal.
La precisión diagnóstica de la sección congelada oscila entre el 94% y el 98% cuando la realizan patólogos experimentados en muestras apropiadas. Los falsos negativos ocurren con mayor frecuencia cuando el área de interés (p. ej., un pequeño depósito tumoral en un ganglio linfático) no está incluida en el bloque de sección congelada. Los falsos positivos son raros, pero pueden resultar de la interpretación de la atipia reactiva como malignidad. Algunos diagnósticos no se pueden realizar con una sección congelada: la clasificación definitiva de muchos tumores, el diagnóstico de trastornos linfoproliferativos y la evaluación de la invasión de la cápsula en los tumores de tiroides generalmente se posponen a las secciones permanentes.
Artefactos específicos de las secciones congeladas
Los cristales de hielo aparecen como espacios angulares vacíos dentro del tejido, distorsionando la arquitectura. La congelación rápida (nitrógeno líquido) minimiza la formación de cristales de hielo en comparación con la congelación lenta en la cámara criostática.
Las líneas de fractura ocurren cuando el tejido está demasiado duro o demasiado frío, lo que hace que la sección se agriete durante el corte. Calentar ligeramente el bloque o cortarlo más lentamente puede ayudar.
Los pliegues y las arrugas son más comunes en las secciones congeladas que en las secciones de parafina porque las secciones son más gruesas y menos adherentes al portaobjetos.
El artefacto de congelación en el tejido adiposo hace que la grasa aparezca como vacuolas vacías con septos delgados y rotos, lo que limita la evaluación de las lesiones grasas.
Diagnóstico Diferido y la Sección Permanente
Después de la sección congelada, el tejido restante se descongela, se fija en formalina y se procesa de forma rutinaria para obtener secciones permanentes en parafina. El diagnóstico de sección permanente reemplaza al diagnóstico de sección congelada. Las discrepancias entre diagnósticos congelados y permanentes se revisan en conferencias de control de calidad. La sección congelada es una consulta, no un diagnóstico final; esta distinción es fundamental para la seguridad del paciente y la documentación médico-legal.
