La tinción imparte contraste con las secciones de tejido translúcidas, lo que permite distinguir los componentes celulares y extracelulares en [microscopía] de campo claro (/guides/microscopy-techniques.html). La tinción estándar en histopatología es la hematoxilina y eosina (H&E), pero existen docenas de tinciones especializadas para resaltar estructuras, microorganismos y sustancias químicas específicas.
Hematoxilina y eosina (H&E)
H&E es la tinción caballo de batalla de la histopatología y se utiliza en prácticamente todas las secciones procesadas de forma rutinaria. La hematoxilina, un tinte básico, une estructuras ácidas (núcleos, ribosomas, retículo endoplásmico rugoso) y las tiñe de color azul violeta (basófilo). La eosina, un tinte ácido, une estructuras básicas (proteínas citoplasmáticas, colágeno, glóbulos rojos) y las tiñe de color rojo rosado (eosinófilo).
Una sección H&E adecuadamente teñida muestra detalles nucleares nítidos con cromatina abierta o condensada, nucléolos visibles y membranas nucleares bien definidas. El citoplasma debe mostrar cualidades tintóreas apropiadas: las células acinares pancreáticas tienen un aspecto granular debido a los gránulos de zimógeno, las células musculares tienen un aspecto eosinófilo y fibrilar, y la matriz del cartílago tiene un aspecto vítreo y basófilo. Artefactos como tinción excesiva (núcleos turbios), tinción insuficiente (núcleos pálidos) o tinción desigual indican problemas en el proceso de tinción o [procesamiento de tejidos] deficiente (/guides/tissue-processing-and-sectioning.html).
Tinciones especiales para tejido conectivo
Tricromo de Masson tiñe el colágeno de azul o verde, el músculo y el citoplasma de rojo y los núcleos de negro. Se utiliza para evaluar la fibrosis en enfermedades hepáticas, distrofias musculares y cicatrices miocárdicas.
Verhoeff-van Gieson (VVG) tiñe las fibras elásticas de negro, el colágeno de rojo y el músculo de amarillo. Es esencial para evaluar enfermedades vasculares y trastornos de las fibras elásticas.
Tinción de reticulina (impregnación de plata) tiñe el colágeno tipo III (fibras de reticulina) de negro. Resalta el marco arquitectónico de los órganos y es fundamental para diagnosticar trastornos de la médula ósea y enfermedades hepáticas.
El ácido periódico de Schiff (PAS) tiñe de magenta el glucógeno, las glicoproteínas y las paredes celulares de los hongos. Se utiliza para identificar organismos fúngicos, diagnosticar enfermedades por almacenamiento de glucógeno y resaltar las membranas basales en biopsias renales. La digestión de PAS con diastasa (PAS-D) distingue el glucógeno (eliminado por la diastasa) de otros materiales PAS positivos.
Tinciones para microorganismos
La tinción de Gram (adaptación del tejido) diferencia las bacterias Gram positivas (púrpura) de las Gram negativas (rosa) en secciones de tejido. A diferencia de la técnica de tinción de Gram bacteriana utilizada en microbiología, la tinción de Gram tisular funciona en secciones de parafina.
Ziehl-Neelsen tiñe los bacilos acidorresistentes (Mycobacterium tuberculosis) de color rojo brillante sobre una contratinción azul o verde.
Metenamina de plata (GMS) de Grocott tiñe de negro las paredes celulares de los hongos y es el tinte más sensible para detectar hongos en los tejidos.
Warthin-Starry tiñe las espiroquetas y el Helicobacter pylori de negro sobre un fondo amarillo pálido.
Tinciones para gránulos e inclusiones citoplasmáticas
La tinción de Giemsa se utiliza en biopsias de trefina de médula ósea para evaluar las células hematopoyéticas y puede detectar Helicobacter pylori, mastocitos y ciertos parásitos.
Luxol Fast Blue (LFB) tiñe la mielina de color azul verdoso y se utiliza en neuropatología para evaluar enfermedades desmielinizantes.
El Rojo Congo tiñe los depósitos de amiloide de color rosa salmón bajo iluminación de campo brillante y muestra una birrefringencia de color verde manzana bajo luz polarizada, el estándar de diagnóstico para la amiloidosis.
Histoquímica e histoquímica enzimática
La histoquímica utiliza reacciones químicas para localizar sustancias específicas en secciones de tejido. El Azul de Prusia de Perls detecta el hierro férrico (hemosiderina) como un precipitado azul, que se utiliza para diagnosticar trastornos por sobrecarga de hierro. La tinción de Von Kossa detecta depósitos de calcio (negros o marrones) en los tejidos blandos. Oil Red O (en secciones congeladas) tiñe los lípidos neutros de color rojo anaranjado.
La histoquímica enzimática detecta la actividad enzimática in situ. Los ejemplos incluyen fosfatasa alcalina (hueso e hígado), fosfatasa ácida (próstata) y esterasa no específica (macrófagos). Estas técnicas requieren tejido fresco o congelado porque la fijación inactiva las enzimas.
Inmunohistoquímica
Inmunohistoquímica (IHC) utiliza anticuerpos conjugados con enzimas (peroxidasa de rábano picante, fosfatasa alcalina) para detectar antígenos específicos en secciones de tejido. La reacción se visualiza con cromógenos como DAB (marrón) o Fast Red (rojo). La IHC ha reemplazado en gran medida muchas tinciones especiales y técnicas de histoquímica enzimática debido a su especificidad superior. Es indispensable para la clasificación de tumores (queratinas, marcadores de CD), el diagnóstico de enfermedades infecciosas y las pruebas de biomarcadores predictivos (HER2, PD-L1, proteínas reparadoras de errores de coincidencia).
