Antikörperscreening (indirekter Antiglobulintest, IAT) und Kreuzvergleich sind wesentliche Kompatibilitätsverfahren vor der Transfusion. Diese Tests erkennen klinisch signifikante Antikörper im Patientenplasma, die hämolytische Transfusionsreaktionen oder hämolytische Erkrankungen des Fötus und Neugeborenen verursachen könnten.
Der indirekte Antiglobulintest (IAT)
Der IAT erkennt unerwartete Erythrozyten-Antikörper im Patientenplasma. Patientenplasma wird mit Reagenz-Screening-Erythrozyten bekannter Antigen-Phänotypen inkubiert (typischerweise zwei oder drei Zellsätze, die klinisch signifikante Antigene abdecken, einschließlich D, C, c, E, e, K, k, Fyᵃ, Fyᵇ, Jkᵃ, Jkᵇ, Leᵃ, Leᵇ, M, N, S, s, P1). Nach der Inkubation bei 37 °C zur Antikörperbindung werden die Zellen gewaschen, um ungebundene Immunglobuline zu entfernen. Es wird Anti-Human-Globulin (AHG, Coombs-Reagenz) zugesetzt, das zellgebundene IgG-Antikörper überbrückt und bei Vorhandensein von Antikörpern eine Agglutination verursacht. Der IAT kann in Röhrchen-, Gelsäulen- (Mikrosäulen-) oder Festphasenmethoden durchgeführt werden, wobei Gel und Festphase eine verbesserte Standardisierung und Empfindlichkeit bieten.
Antikörperidentifizierung
Wenn das Antikörper-Screening positiv ausfällt, erfolgt die Identifizierung durch Testen des Patientenplasmas gegen eine Gruppe von 11–16 phänotypisierten Erythrozyten. Das Reaktivitätsmuster wird analysiert, um die Antikörperspezifität zu bestimmen. Es können mehrere Antikörper gleichzeitig vorhanden sein, was einen sorgfältigen Ausschluss erfordert. Zu den Merkmalen häufiger klinisch bedeutsamer Antikörper gehören: Anti-K (IgG, starke anamnestische Reaktion), Anti-Fyᵃ (IgG, Dosierungseffekt), Anti-Jkᵃ (IgG, schwer nachweisbar, verbunden mit verzögerten hämolytischen Reaktionen), Anti-M (oft IgM, kältereaktiv, normalerweise klinisch unbedeutend bei 37 °C) und Anti-E (IgG, häufig anzutreffen). Zur Beurteilung des HDFN-Risikos werden Antikörpertiter für klinisch signifikante Antikörper während der Schwangerschaft gemessen.
Das Crossmatch
Der Crossmatch ist die abschließende Überprüfung der Kompatibilität zwischen Spender-Erythrozyten und dem beabsichtigten Empfänger. Es gibt drei Methoden. Der sofortige Spin-Crossmatch erkennt ABO-Inkompatibilität, indem Empfängerplasma mit Spender-Erythrozyten bei Raumtemperatur gemischt und auf Agglutination überprüft wird. Der Antiglobulin-Kreuztest (AHG-Kreuztest) ist der empfindlichste Test, bei dem Empfängerplasma mit Spender-Erythrozyten bei 37 °C inkubiert wird, gefolgt von AHG, wodurch Antikörper gegen alle klinisch signifikanten Antigene nachgewiesen werden. Der Computer-(elektronische) Kreuzvergleich wird verwendet, wenn der Patient ein negatives Antikörper-Screening hat und keine klinisch signifikanten Antikörper in der Vorgeschichte aufweist. Dabei wird auf eine Computerüberprüfung der ABO-Kompatibilität zwischen der Spendereinheit und dem Empfängertyp zurückgegriffen.
Klinisch signifikante Antikörper
Antikörper werden als klinisch bedeutsam eingestuft, wenn sie hämolytische Transfusionsreaktionen, HDFN oder eine verringerte Erythrozytenüberlebensrate verursachen können. Die bedeutendsten sind jene gegen ABO (IgM, intravaskuläre Hämolyse), Rh (D, C, c, E, e – IgG, extravaskuläre Hämolyse), Kell (K, k – IgG, stark immunogen), Duffy (Fyᵃ, Fyᵇ – IgG, assoziiert mit verzögerten Reaktionen), Kidd (Jkᵃ, Jkᵇ – IgG, beteiligt an verzögerten hämolytischen Reaktionen, anfällig für sinkt auf nicht mehr nachweisbare Werte) und MNS (S, s – IgG). Zu den klinisch unbedeutenden Antikörpern (normalerweise IgM, kältereaktiv, nicht reaktiv bei 37 °C) gehören Anti-Leᵃ, Anti-Leᵇ, Anti-I, Anti-P1 und die meisten Anti-M. Zur Unterscheidung sind thermische Amplitudentests und Antigentypisierung erforderlich.
Besondere Überlegungen
Patienten mit einem positiven Antikörpertest benötigen antigennegative Erythrozyteneinheiten zur Transfusion. Die Blutbank muss einen Bestand phänotypisierter Spendereinheiten für alloimmunisierte Patienten führen. Patienten mit warmer autoimmuner hämolytischer Anämie (AIHA) stellen besondere Herausforderungen dar, da der Autoantikörper eine Panreaktivität im IAT und Crossmatch verursacht. Zu den Techniken zur Lösung von Autoantikörperinterferenzen gehören Autokontrolltests, Kaltadsorption und Alloadsorption zum Nachweis zugrunde liegender Alloantikörper. Bei Patienten mit einer Vorgeschichte kürzlicher Transfusionen oder einer Schwangerschaft innerhalb von 3 Monaten kann ein negatives Antikörperscreening vorliegen, es besteht jedoch weiterhin das Risiko verzögerter hämolytischer Reaktionen aufgrund niedriger Alloantikörper unterhalb der Nachweisschwelle.
Qualitätskontrolle und Dokumentation
Alle Antikörper-Screening- und Crossmatching-Verfahren erfordern eine tägliche Qualitätskontrolle: Überprüfung der Reagenzienintegrität (AHG, Screening-Zellen, Verstärkungsmedien), Positiv- und Negativkontrollen und Dokumentation aller Ergebnisse. Die Krankengeschichte des Patienten muss auf frühere Antikörper überprüft werden. Eine Untersuchung der Transfusionsreaktion erfordert ein Antikörperscreening nach der Transfusion, einen direkten Antiglobulintest und einen wiederholten Kreuzvergleich mit der transfundierten Einheit.
