Bindegewebsfärbungen sind eine Gruppe histochemischer Techniken, die die Hauptbestandteile der extrazellulären Matrix – Kollagen, elastische Fasern, Retikulin und Basalmembran – voneinander und von Muskelzellen unterscheiden. Sie sind für die Beurteilung von Fibrose, Gefäßpathologie und Stromareaktionen unerlässlich.
Massons Trichrome
Massons Trichrom verwendet drei Farbstoffe, um verschiedene Gewebebestandteile zu färben. Weigerts Eisenhämatoxylin färbt Kerne schwarz. Ein saurer Farbstoff (Biebrich-Scharlachsäurefuchsin) färbt Muskeln und Zytoplasma rot. Ein anionischer Farbstoff (Anilinblau oder Methylblau) färbt Kollagen blau (oder grün, mit hellgrünem SF als drittem Farbstoff). Die Differenzierung in Phosphorwolfram- oder Phosphomolybdänsäure steuert, wie viel roter Farbstoff zurückgehalten wird – Muskeln bleiben rot, während Kollagen entfärbt wird und die blaue Gegenfärbung aufnimmt.
Zu den Anwendungen gehören die Beurteilung von Leberfibrose (METAVIR-Stadium, Ishak-Score), Myokardfibrose nach Infarkt, Muskelerkrankungen (Dystrophien weisen einen Anstieg des endomysialen Kollagens auf) und Nierenfibrose (interstitielle Fibrose und tubuläre Atrophie). Die Färbung hebt auch glomeruläre Basalmembranen hervor und hilft bei der Identifizierung von Fibrinoidenekrose in Gefäßen.
Verhoeff-van Gieson (VVG)
VVG färbt elastische Fasern schwarz mit der elastischen Färbung von Verhoeff (Hämatoxylin, Eisenchlorid und Jod), gefolgt von einer Van-Gieson-Gegenfärbung (saures Fuchsin und Pikrinsäure), die Kollagen rot und Muskel gelb färbt. Elastische Fasern erscheinen als schwarze, wellige, verzweigte Fasern vor einem rot-gelben Hintergrund. VVG wird zur Beurteilung von Störungen der elastischen Fasern verwendet: Marfan-Syndrom (Fragmentierung und Störung der elastischen Fasern der Aorta), Emphysem (Verlust der elastischen Alveolarfasern) und Arteriosklerose (Verdoppelung und Verkalkung der elastischen Lamina). In der Gefäßpathologie zeigt VVG die inneren und äußeren elastischen Laminae, die für die Identifizierung der Gefäßinvasion durch Tumore und die Klassifizierung arterieller Läsionen unerlässlich sind.
Retikulin-Färbung
Retikulinfärbungen (Silberimprägnierung von Gordon und Sweet oder Gomori) lagern metallisches Silber auf Retikulinfasern (Kollagen Typ III) ab, die vor einem hellen Hintergrund schwarz erscheinen. Retikulin bildet das Stützgerüst von Drüsen, Blutgefäßen und glatten Muskeln. Bei Leberpathologien heben Retikulinflecken die Architektur der Leberplatte hervor – ein Verlust des normalen Retikulingerüsts weist auf eine Zirrhose hin; Eine Ausdehnung zwischen den Platten weist auf regenerative Knötchen hin. Bei Knochenmarkspathologien klassifiziert die Retikulinfärbung die Myelofibrose (MF-0 bis MF-3). In der Tumorpathologie umreißt Retikulin Alveolar- und Drüsenstrukturen und hilft so, schlecht differenzierte Tumore zu klassifizieren.
Phosphowolframsäure-Hämatoxylin (PTAH)
PTAH färbt Fibrin, Querstreifen der quergestreiften Muskulatur, Gliafasern und Zellkerne. Muskelstreifen und Fibrin erscheinen blau; Kollagen und Knorpel erscheinen bräunlich-rosa. PTAH wird zur Diagnose von Fibrinoidenekrose (Vaskulitis), Rhabdomyosarkom (Kreuzstreifenbildung) und Alzheimer-Krankheit (Neurofibrillenbündel und senile Plaques) verwendet. Die Beize erfordert eine sorgfältige Oxidation (Kaliumpermanganat) und Beizung und ist technisch anspruchsvoll.
Actin-Immunhistochemie der glatten Muskulatur
Obwohl es sich nicht um eine histochemische Färbung handelt, hat IHC mit Glattmuskel-Aktin (SMA) herkömmliche Bindegewebsfärbungen zur Identifizierung glatter Muskelzellen und Myofibroblasten weitgehend ersetzt. SMA färbt die glatte Gefäßmuskulatur, Perizyten und Myoepithelzellen. Es wird zur Beurteilung der Tumordifferenzierung (Leiomyosarkom) und der Proliferation von Myofibroblasten verwendet.
Qualitätskontrolle
Für jede Bindegewebsfärbung ist eine Positivkontrolle erforderlich, von der bekannt ist, dass sie die Zielkomponente enthält: Haut oder Dickdarm für Trichrom (Kollagen), Arterie oder Lunge für VVG (elastische Fasern), Leber oder Milz für Retikulin und Muskel oder Fibringerinnsel für PTAH. Bei jeder Charge werden Kontrollen durchgeführt. Über- und Unterfärbung werden durch Vergleich der Kontrollintensität mit etablierten Normen beurteilt. Behebung häufiger Probleme umfasst die Anpassung der Differenzierungszeit (Trichrom), der Eisenchloridkonzentration (VVG) oder der Silberlösungstemperatur (Retikulin).
