Die Methodenvalidierung ist der Prozess, der nachweist, dass eine analytische Methode für ihren beabsichtigten Zweck geeignet ist. Für Standardmethoden führt das Labor eine Methodenverifizierung durch, um zu bestätigen, dass es die erwartete Leistung erreichen kann. Für nicht-standardisierte oder entwickelte Methoden ist eine vollständige Validierung erforderlich.

Zu den wichtigsten Leistungsmerkmalen gehören die Richtigkeit, die die Nähe zum wahren Wert misst und mittels Referenzmaterialien oder Wiederfindungsstudien bewertet wird. Die Präzision umfasst die Wiederholbarkeit (gleiche Bedingungen, kurzer Zeitraum), die Vergleichspräzision (gleiches Labor, verschiedene Tage oder Analysten) und die Reproduzierbarkeit (verschiedene Labore). Die Präzision wird als relative Standardabweichung ausgedrückt.

Die Richtigkeit ist die Übereinstimmung zwischen dem Mittelwert von Wiederholmessungen und dem akzeptierten Referenzwert. Die Messunsicherheit kombiniert alle Fehlerquellen zu einem einzigen Intervall, von dem erwartet wird, dass es den wahren Wert enthält.

Die Spezifität zeigt, dass die Methode den Analyten ohne Störung durch Matrixkomponenten, Abbauprodukte oder verwandte Substanzen misst. Die Nachweisgrenze ist die kleinste Menge, die nachgewiesen, aber nicht unbedingt quantifiziert werden kann. Die Bestimmungsgrenze ist die kleinste Menge, die mit akzeptabler Präzision und Richtigkeit quantifiziert werden kann.

Die Linearität zeigt, dass die Antwort proportional zur Analytkonzentration über den Arbeitsbereich ist, bewertet durch den Korrelationskoeffizienten und die Residuenanalyse. Der Arbeitsbereich erstreckt sich von der Bestimmungsgrenze bis zur höchsten Konzentration mit akzeptabler Leistung. Robustheitstests bewerten die Resistenz der Methode gegenüber absichtlichen Variationen von Parametern wie pH-Wert, Temperatur, Flussrate und Säulenalter.

Die Methodenvalidierung folgt den Richtlinien von ICH Q2(R1) für pharmazeutische Methoden, AOAC für Lebensmittelmethoden und ISO 17025 für allgemeine Labormethoden. Das Validierungsprotokoll spezifiziert die zu bewertenden Leistungsmerkmale, Akzeptanzkriterien und statistischen Verfahren. Ein Validierungsbericht dokumentiert die Ergebnisse und Schlussfolgerungen.