Las tinciones histoquímicas para carbohidratos y mucinas identifican glucógeno, mucinas neutras y ácidas, glicoproteínas y proteoglicanos. Estas tinciones son esenciales para diagnosticar enfermedades metabólicas por almacenamiento, identificar tipos de tumores, detectar organismos fúngicos y evaluar patología gastrointestinal y respiratoria.
Ácido periódico de Schiff (PAS)
PAS es el tinte de carbohidratos más versátil. El ácido periódico oxida los grupos hidroxilo vecinales (presentes en el glucógeno, las glicoproteínas y las mucinas) a aldehídos, que luego reaccionan con el reactivo de Schiff para producir un color magenta. Las estructuras PAS positivas incluyen glucógeno (hígado, músculo cardíaco y esquelético), membranas basales (glomerular y tubular en el riñón; vascular), moco (epitelio gástrico, intestinal y respiratorio), paredes celulares de hongos y parásitos (Echinococcus, Toxoplasma).
PAS con diastasa (PAS-D) utiliza digestión con amilasa para eliminar el glucógeno antes de la tinción con PAS. La positividad del PAS sensible a la diastasa confirma el glucógeno; La positividad del PAS resistente a la diastasa indica glicoproteínas, mucinas o material de la membrana basal. Esta distinción es fundamental: una vacuola citoplasmática PAS positiva sensible a la diastasa contiene glucógeno (p. ej., carcinoma de células renales de células claras), mientras que una vacuola resistente a la diastasa contiene mucina (p. ej., adenocarcinoma de células en anillo de sello).
Azul alcián
El azul alcián es un colorante de ftalocianina que contiene cobre y que se une a mucopolisacáridos ácidos y glicosaminoglicanos sulfatados. A pH 2,5, el azul alcián tiñe de azul tanto las mucinas débilmente ácidas (sialomucinas) como las fuertemente ácidas (sulfatadas). A pH 1,0, solo se tiñen las mucinas fuertemente ácidas (sulfatadas). Esta selectividad dependiente del pH ayuda a caracterizar los tipos de mucina.
El azul alcián se utiliza para identificar metaplasia intestinal (biopsias gástricas: las células caliciformes se tiñen de azul) y para clasificar tumores mucinosos (ovárico, pancreático, apendicular). La combinación de azul alcián-PAS (AB-PAS) distingue las mucinas neutras (PAS positivo, magenta) de las ácidas (azul alcián positivo, azul) en una sola sección. En patología pulmonar, AB-PAS demuestra la producción de mucina en el adenocarcinoma; en el cartílago, el azul alcián tiñe los proteoglicanos.
Mucicarmín
El mucicarmín tiñe las mucinas epiteliales de color rosa intenso a rojo. Utiliza un complejo de aluminio-carmín que se une a mucopolisacáridos ácidos. El mucicarmín se utiliza más comúnmente para demostrar la producción de mucina en el adenocarcinoma y para identificar la cápsula de Cryptococcus neoformans, que se tiñe de rojo intenso (el organismo en sí es mucicarmín negativo). Es más específico para las mucinas epiteliales que el azul alcián pero menos sensible.
Hierro coloidal
El hierro coloidal se une a mucinas ácidas a pH bajo y se visualiza mediante la reacción del azul de Prusia (de color amarillo-marrón a azul). Es más sensible que el azul alcián para detectar pequeñas cantidades de mucinas ácidas, pero técnicamente es más difícil. El hierro coloidal se utiliza para detectar sialomucinas en metaplasia intestinal temprana y mucinas ácidas en tumores de ovario.
Carmín de Best
El carmín de Best tiñe específicamente el glucógeno de rojo. Proporciona una tinción de glucógeno más fuerte que el PAS (que tiñe muchas clases de carbohidratos), pero se utiliza sólo para la identificación de glucógeno debido a su gama de colores limitada. El carmín de Best se utiliza para confirmar tumores ricos en glucógeno (carcinoma de células claras, sarcoma de Ewing, tumores de células germinales) cuando los resultados de PAS-D son ambiguos.
Aplicaciones en Patología
Patología gastrointestinal utiliza PAS-azul alcián para clasificar la metaplasia gástrica e intestinal, el esófago de Barrett y los carcinomas mucinosos. Patología renal utiliza PAS para evaluar el engrosamiento de la membrana basal glomerular, la expansión mesangial y la integridad de la membrana basal tubular. Patología hepática: PAS-D resalta los glóbulos de alfa-1-antitripsina (glóbulos citoplasmáticos de color magenta, resistentes a la diastasa) y el material de almacenamiento de células de Kupffer. Enfermedades infecciosas: PAS y GMS se utilizan juntos para detectar organismos fúngicos; El mucicarmín identifica específicamente a Cryptococcus. Patología tumoral: las tinciones de mucina clasifican los adenocarcinomas (mucinosos, en anillo de sello, coloides) y los distinguen de las neoplasias malignas no mucinosas. El control de calidad de las tinciones de carbohidratos requiere controles positivos con un contenido de carbohidratos conocido (hígado para glucógeno, colon para mucinas, cordón umbilical para proteoglicanos).
