La neurohistología es el estudio de la anatomía microscópica del sistema nervioso, el cerebro, la médula espinal, los nervios periféricos y los órganos sensoriales. El tejido nervioso presenta desafíos únicos para la histopatología debido a su alto contenido lipídico, su compleja citoarquitectura y la vulnerabilidad selectiva de diferentes tipos celulares a la enfermedad.
Organización del Sistema Nervioso
El sistema nervioso central (SNC): cerebro y médula espinal, consiste en sustancia gris (cuerpos de neuronas, dendritas, sinapsis, células gliales) y sustancia blanca (axones mielinizados y oligodendrocitos). El sistema nervioso periférico (SNP) comprende los nervios craneales, los nervios espinales y los ganglios periféricos, con células de Schwann que reemplazan a los oligodendrocitos como células mielinizantes.
Neuronas son las unidades funcionales, células grandes con arbors dendríticos especializados y axones largos. Su tamaño, forma y contenido de neurotransmisores varían según la región: neuronas piramidales (corteza cerebral), células de Purkinje (cerebelo), motoneuronas (asta anterior de la médula espinal) y neuronas sensoriales (ganglios de la raíz dorsal). Células gliales superan en número a las neuronas 10:1 e incluyen: astrocitos (soporte, metabolismo del glutamato, barrera hematoencefálica, GFAP-positivos), oligodendrocitos (producción de mielina del SNC, Olig2-positivos), microglía (células inmunes residentes, Iba1, CD68-positivas) y células ependimarias (revestimiento de los ventrículos).
Manejo y Fijación del Tejido
El tejido cerebral es extremadamente blando y debe fijarse adecuadamente antes de seccionarlo. La fijación del cerebro completo requiere 7-14 días en NBF al 10%. El seccionamiento coronal del cerebro, el seccionamiento transversal del tronco encefálico y la médula espinal, y el seccionamiento sagital del cerebelo son estándar. Especímenes de biopsia (biopsias cerebrales estereotácticas) son pequeños (núcleos de 1-2 mm) y requieren manejo cuidadoso, a menudo envueltos en papel de lente antes del procesamiento para evitar la pérdida de fragmentos.
Fijadores especiales para neurohistología incluyen solución de Bouin (hipófisis y regiones cerebrales relacionadas con el sistema endocrino), glutaraldehído (para microscopía electrónica de nervio y músculo) y formalina tamponada (rutinaria). El procesamiento en parafina es estándar para neuropatología diagnóstica; las secciones congeladas se usan para consulta intraoperatoria (preparaciones por frotis o secciones de criostato).
Tinciones Neurohistológicas Estándar
H&E es la tinción primaria para detalle celular, sustancia de Nissl neuronal (RE rugoso, gránulos basofílicos), morfología nuclear e identificación de células gliales. Luxol Fast Blue (LFB) tiñe la mielina de azul-verde y es la tinción estándar para evaluar mielinización y desmielinización. LFB con contratinción de H&E (LFB-HE) o LFB-PAS demuestra tanto mielina como morfología celular en una sola sección. LFB con Violeta de Cresilo (LFB-CV): la combinación “luxol fast blue-violeta de cresilo” tiñe la mielina de azul y las neuronas de violeta, usada para estudios citoarquitectónicos.
Tinción argéntica de Bielschowsky impregna neurofibrillas y placas neuríticas, demostrando ovillos neurofibrilares (enfermedad de Alzheimer), placas neuríticas y cuerpos de Pick (enfermedad de Pick). Tinción argéntica de Bodian es similar, visualizando axones y neurofibrillas.
Identificación de Células Gliales por IHQ
La IHQ ha reemplazado en gran medida las tinciones histoquímicas tradicionales para la identificación de tipos celulares en neuropatología. GFAP (proteína ácida fibrilar glial), el marcador definitorio de astrocitos y tumores astrocíticos (astrocitoma, glioblastoma). Olig2: marcador nuclear de oligodendrocitos y tumores oligodendrogliales. Iba1 y CD68: marcadores de microglía/macrófagos, sobreexpresados en inflamación y neurodegeneración. NeuN: proteína nuclear neuronal, identifica neuronas maduras y se pierde en muchas enfermedades neurodegenerativas. Neurofilamento (NF): marcador axonal, demuestra densidad axonal, esferoides y torpedos. Sinaptofisina: proteína de vesículas sinápticas, identifica densidad sináptica en afecciones neurodegenerativas.
Regiones Especiales
Hipocampo: la región CA1 es selectivamente vulnerable a anoxia e isquemia. La esclerosis hipocampal se asocia con epilepsia del lóbulo temporal. Sustancia negra: neuronas pigmentadas que degeneran en la enfermedad de Parkinson; el pigmento neuromelanina es visible en H&E sin tinciones especiales. Cerebelo: las células de Purkinje son selectivamente vulnerables a hipoxia, toxinas y síndromes paraneoplásicos. Médula espinal: pérdida de motoneuronas en la esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
Artefactos
Neuronas oscuras: neuronas encogidas, hipereosinofílicas resultantes de fijación retardada o manejo traumático del cerebro no fijado. Pueden confundirse con lesión isquémica o hipóxica. Artefacto de remolino: por disrupción tisular traumática durante biopsia estereotáctica. Artefacto de cauterización: por electrocauterio usado durante la resección quirúrgica, causando necrosis coagulativa en los bordes del tejido. Artefacto de congelación: por crioprotección inadecuada en secciones congeladas.
