Die flüssigkeitsbasierte Zytologie (LBC) hat die herkömmliche Abstrichvorbereitung für die Zervixzytologie weitgehend ersetzt und wird zunehmend auch für nicht-gynäkologische Proben eingesetzt. Durch das Sammeln von Zellen in einem flüssigen Konservierungsmittel ermöglicht LBC eine gleichbleibende Objektträgerqualität, weniger verdeckendes Material und – was entscheidend ist – molekulare Reflextests aus der Restprobe.
LBC-Plattformen
ThinPrep (Hologic) – das Entnahmegerät wird in PreservCyt-Lösung (auf Methanolbasis) gespült. Der Prozessor dispergiert die Zellen, sammelt sie auf einem Polycarbonatfilter und überträgt sie auf einen Objektträger in einem Kreis mit 20 mm Durchmesser. Die standardisierte Monoschicht reduziert Zellüberlappungen und die Verhinderung von Blut oder Entzündungen.
SurePath (BD) – das Entnahmegerät wird in CytoRich-Lösung gespült. Der Prozessor verwendet Dichtegradientenzentrifugation, um diagnostische Zellen von Blut, Schleim und Zelltrümmern zu trennen, bevor er die Zellen in einem 13-mm-Kreis ablagert. SurePath erstellt sauberere Objektträger für blutige Proben.
Vorteile von LBC
Reduzierte Unbefriedigungsrate – LBC reduziert unbefriedigende Pap-Tests von 5-15 % auf 1-3 %, indem es undurchsichtiges Blut, Entzündungen und dicke Zellgruppen herausfiltert. Verbesserte Sensitivität – Metaanalysen zeigen, dass LBC im Vergleich zu herkömmlichen Abstrichen eine gleichwertige oder leicht höhere Sensitivität für HSIL+ aufweist. Restprobe – die verbleibende PreservCyt- oder CytoRich-Flüssigkeit (typischerweise 10–20 ml) steht für HPV-Tests, Chlamydien-/Gonorrhoe-Tests und molekulare Biomarker-Analysen zur Verfügung. Mehrere Objektträger – für spezielle Färbungen oder IHC können zusätzliche Objektträger aus demselben Fläschchen vorbereitet werden.
LBC in der nicht-gynäkologischen Zytologie
LBC wird zunehmend für Körperflüssigkeiten, Urin, FNA-Proben und Atemwegsproben verwendet. Zu den Vorteilen gehören eine konzentrierte Zellvorbereitung, die Entfernung von verdeckendem Blut und ein konsistenter Hintergrund. Zu den Nachteilen gehören der Verlust architektonischer Hinweise (dreidimensionale Cluster können verstreut sein) und Veränderungen in der Zellmorphologie (Zellen erscheinen kleiner, Chromatin weniger klar als bei herkömmlichen Abstrichen). Labore müssen LBC für jeden nicht-gynäkologischen Probentyp anhand herkömmlicher Präparate validieren.
HPV-Test von LBC
Zervikale LBC-Proben sind die primäre Probe für HR-HPV-Tests. Signalverstärkungsmethoden (Hybrid Capture 2, Cervista) erkennen HPV-DNA aus einem Pool von 13–14 Hochrisikotypen ohne Genotypisierung. Zielamplifikationsmethoden (PCR-basiert: Cobas 4800, Aptima) erkennen und genotypisieren HPV 16 und 18 getrennt von anderen HR-Typen. Cobas 4800 ist von der FDA für das primäre HPV-Screening und Co-Testing zugelassen. Aptima erkennt E6/E7-mRNA, was eher auf eine transkriptionell aktive Infektion als auf vorübergehende HPV-DNA hinweist. HPV-Tests von LBC weisen die gleiche Sensitivität und Spezifität auf wie Tests aus separat entnommenen Gebärmutterhalsproben.
Molekulare Tests aus zytologischen Proben
FISH (Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung) an zytologischen Proben erkennt Chromosomenanomalien. UroVysion FISH (Chromosomen 3, 7, 17 und 9p21) erhöht die Empfindlichkeit für Urothelkarzinome in der Urinzytologie. ALK-Break-Apart-FISH auf Lungen-FNA-Zellblöcken identifiziert ALK-umgelagertes Adenokarzinom.
PCR-basierte Tests an zytologischen Proben erkennen Mutationen (EGFR, KRAS, BRAF), virale DNA (HPV, EBV, CMV) und Klonalität (IgH- und TCR-Genumlagerungen für Lymphome). DNA aus zytologischen Objektträgern oder Zellblöcken ist für die meisten PCR-Anwendungen ausreichend. Die Empfindlichkeit ist vergleichbar mit histologischen Proben.
Next-Generation-Sequenzierung (NGS) – Zellblöcke aus FNA- und Ergussproben liefern ausreichend DNA für gezielte NGS-Panels (50–500 Gene). Eine umfassende genomische Profilierung anhand zytologischer Proben leitet die gezielte Therapieauswahl. Die Erfolgsraten (ausreichende DNA für NGS) liegen bei über 90 %, wenn Zellblöcke mindestens 20 % Tumorzellularität enthalten.
Qualität und Validierung
Molekulare Tests an zytologischen Proben erfordern eine Validierung anhand der Histologie oder des bekannten Mutationsstatus. Zu den präanalytischen Variablen gehören der Fixiermitteltyp (Methanol-basiertes PreservCyt vs. Ethanol), die Lagerzeit und -temperatur sowie die Zellkonzentration. Laboratorien müssen Mindestanforderungen an die Zellularität festlegen und die Eignung der Proben für molekulare Tests dokumentieren. Qualitätssicherungsprogramme umfassen Eignungstests für molekulare Tests an zytologischem Material.
Zukünftige Richtungen
Digitale Zytologie – Die Ganzkörperbildgebung von LBC-Objektträgern ermöglicht eine Fernüberprüfung, ein computergestütztes Screening und eine auf künstlicher Intelligenz basierende Erkennung abnormaler Zellen. Multiplex-Biomarker-Panels – Die Analyse von Proteinen (IHC) und Nukleinsäuren (FISH, Mutation) aus demselben Zellblock ermöglicht eine integrierte Diagnose und Therapieauswahl. Zirkulierende Tumorzellen (CTCs) und Flüssigkeitsbiopsie (zellfreie DNA aus Blut) erweitern die Zytologie über die Probenahme von Festgewebe hinaus auf die nicht-invasive Krebserkennung und -überwachung. Diese Technologien ergänzen die traditionelle Zytomorphologie, anstatt sie zu ersetzen, und ihre Interpretation erfordert die Integration in den klinischen und bildgebenden Kontext.
