La validation de méthode est le processus qui démontre qu’une méthode analytique est adaptée à son usage prévu. Pour les méthodes standardisées, le laboratoire effectue une vérification de méthode pour confirmer qu’il peut atteindre les performances attendues. Pour les méthodes non standardisées ou développées en interne, une validation complète est requise.
Les caractéristiques de performance clés incluent l’exactitude, qui mesure la proximité de la valeur vraie et est évaluée à l’aide de matériaux de référence ou d’études de récupération. La précision englobe la répétabilité (mêmes conditions, courte durée), la précision intermédiaire (même laboratoire, différents jours ou analystes) et la reproductibilité (différents laboratoires). La précision est exprimée comme l’écart type relatif.
La justesse est l’étroitesse de l’accord entre la moyenne de mesures répétées et la valeur de référence acceptée. L’incertitude de mesure combine toutes les sources d’erreur en un seul intervalle censé contenir la valeur vraie.
La spécificité démontre que la méthode mesure l’analyte sans interférence des composants de la matrice, des produits de dégradation ou des substances apparentées. La limite de détection est la plus petite quantité qui peut être détectée mais pas nécessairement quantifiée. La limite de quantification est la plus petite quantité qui peut être quantifiée avec une précision et une exactitude acceptables.
La linéarité montre que la réponse est proportionnelle à la concentration de l’analyte sur la gamme de travail, évaluée par le coefficient de corrélation et l’analyse des résidus. La gamme de travail s’étend de la limite de quantification à la concentration la plus élevée avec des performances acceptables. Les tests de robustesse évaluent la résistance de la méthode à des variations délibérées de paramètres tels que le pH, la température, le débit et l’âge de la colonne.
La validation de méthode suit les directives de l’ICH Q2(R1) pour les méthodes pharmaceutiques, de l’AOAC pour les méthodes alimentaires et de l’ISO 17025 pour les méthodes générales de laboratoire. Le protocole de validation spécifie les caractéristiques de performance à évaluer, les critères d’acceptation et les procédures statistiques. Un rapport de validation documente les résultats et les conclusions.
