La visualisation des composants cellulaires du système nerveux nécessite des colorations spécialisées qui mettent en évidence les gaines de myéline, les prolongements neuronaux et les cellules gliales. Ces techniques sont essentielles pour diagnostiquer les maladies démyélinisantes, les troubles neurodégénératifs et les tumeurs cérébrales.
Colorations de la Myéline
Luxol Fast Blue (LFB) est la coloration histochimique standard pour la myéline. Le colorant cuivre-phtalocyanine se lie au composant protéique basique des gaines de myéline, produisant une couleur bleu-vert. Le LFB est utilisé pour évaluer les profils de myélinisation (normale vs hypomyélinisation dans les leucodystrophies), la démyélinisation (plaques de sclérose en plaques — zones bien délimitées de perte de myéline avec préservation axonale relative) et la pathologie de la substance blanche (œdème, infarctus, leucoencéphalopathie). Le LFB est généralement combiné avec H&E ou PAS pour les détails cellulaires.
Solochrome cyanine est une coloration rapide de la myéline qui produit une coloration bleu-noir en 10-15 minutes. Elle est utilisée pour les coupes congelées et l’évaluation rapide de la myélinisation.
IHC de la protéine basique de la myéline (MBP) détecte le composant MBP des gaines de myéline. L’IHC MBP est plus sensible que le LFB pour détecter la démyélinisation précoce et les débris de myéline résiduels. Elle est utilisée pour confirmer la démyélinisation dans les biopsies de sclérose en plaques et pour identifier la myéline centrale dans les tumeurs des gaines nerveuses.
Colorations Neuronales
Violet de Crésyl (CV) — une coloration de Nissl qui se lie à l’ARN ribosomique dans le cytoplasme neuronal, produisant une substance de Nissl violette. Le CV démontre la densité neuronale, le profil de Nissl (la perte de substance de Nissl — chromatolyse — indique une lésion axonale) et la morphologie nucléaire. La combinaison classique LFB-CV colore la myéline (bleu) et les neurones (violet) dans la même coupe.
Imprégnation argentique de Bielschowsky — une méthode argentique de réduction qui colore les neurofibrilles (intracellulaires) et les prolongements neuritiques (axones et dendrites) en noir sur un fond brun pâle. Elle démontre les enchevêtrements neurofibrillaires (enchevêtrements intracellulaires en forme de flamme dans la maladie d’Alzheimer), les plaques neuritiques (dépôts extracellulaires d’amyloïde avec neurites dystrophiques), les corps de Pick (inclusions intracytoplasmiques rondes dans la maladie de Pick) et les neuropil threads (neurites dystrophiques dans le neuropile).
IHC NeuN (Noyaux Neuronaux) — un marqueur spécifique des neurones matures. NeuN est une protéine nucléaire exprimée dans la plupart des types neuronaux (les exceptions incluent les cellules de Purkinje du cervelet, les photorécepteurs de la rétine et les neurones olivaires inférieurs). La perte de coloration NeuN indique une lésion ou une mort neuronale.
IHC du neurofilament (NF) — détecte le cytosquelette axonal. Les colorations du neurofilament démontrent les sphéroïdes axonaux (axones gonflés, NF-positifs dans les lésions axonales) et les torpilles (axones gonflés des cellules de Purkinje dans la dégénérescence cérébelleuse). Le NF est également utilisé pour évaluer la densité axonale dans les biopsies de nerfs périphériques.
Colorations Gliales
IHC GFAP (protéine acide fibrillaire gliale) est le marqueur définissant des astrocytes. Dans le cerveau normal, le GFAP colore les astrocytes protoplasmiques et fibreux avec des prolongements fins et ramifiés. Dans l’astrogliose réactive (réponse à toute lésion du SNC), la régulation à la hausse du GFAP produit une hypertrophie des corps cellulaires et des prolongements — astrocytes « gemistocytiques ». Le GFAP est également le marqueur de lignée pour les tumeurs astrocytaires (astrocytome, glioblastome, xanthoastrocytome pléomorphe).
IHC Olig2 — marqueur nucléaire des oligodendrocytes et de leurs précurseurs. Olig2 est exprimé dans les oligodendrogliomes et est un marqueur sensible pour les néoplasmes gliaux. Il est également exprimé dans un sous-ensemble de tumeurs du parenchyme pinéal.
IHC Iba1 (molécule adaptatrice de liaison au calcium ionisée 1) — un marqueur spécifique de la microglie qui colore à la fois la microglie au repos (ramifiée) et activée (amiboïde). La microglie activée est régulée à la hausse dans les maladies neurodégénératives (Alzheimer, Parkinson, SLA), la sclérose en plaques et les infections. CD68 — un marqueur lysosomal dans les macrophages et la microglie activée, utilisé pour évaluer le degré d’infiltrat inflammatoire.
Applications dans les Maladies Démyélinisantes
Sclérose en plaques — le LFB démontre des plaques démyélinisantes périveinulaires bien délimitées dans la substance blanche. L’IHC du neurofilament montre une préservation axonale relative dans la plaque. L’IHC MBP confirme la perte de myéline. L’IHC CD68 met en évidence l’infiltration macrophagique/microgliale. L’IHC GFAP montre une astrogliose réactive au bord de la plaque.
Leucoencéphalopathie multifocale progressive (LEMP) — l’infection des oligodendrocytes par le virus JC provoque une démyélinisation parcellaire avec des noyaux oligodendrogliaux élargis et infectés par le virus. Le LFB montre une perte de myéline ; l’IHC SV40 (réaction croisée avec le virus JC) confirme le diagnostic.
Leucodystrophies — les erreurs innées du métabolisme de la myéline (leucodystrophie métachromatique, adrénoleucodystrophie, maladie de Krabbe) montrent une perte diffuse de myéline sur LFB avec un matériel de stockage spécifique identifié par des colorations spéciales. L’assurance qualité pour les colorations neuropathologiques inclut des contrôles positifs connus (cerveau avec pathologie Alzheimer pour Bielschowsky, plaque de sclérose en plaques pour LFB).
