Les colorations du tissu conjonctif sont un groupe de techniques histochimiques qui distinguent les principaux composants de la matrice extracellulaire — collagène, fibres élastiques, réticuline et membrane basale — les uns des autres et des cellules musculaires. Elles sont essentielles pour évaluer la fibrose, la pathologie vasculaire et les réactions stromales.
Trichrome de Masson
Le trichrome de Masson utilise trois colorants pour colorer différents composants tissulaires. L’hématoxyline ferrique de Weigert colore les noyaux en noir. Un colorant acide (Biebrich scarlet-acid fuchsin) colore le muscle et le cytoplasme en rouge. Un colorant anionique (bleu d’aniline ou bleu de méthyle) colore le collagène en bleu (ou vert, avec le vert lumière SF comme troisième colorant). La différenciation dans l’acide phosphotungstique ou phosphomolybdique contrôle la quantité de colorant rouge retenue — le muscle reste rouge, tandis que le collagène est décoloré et capte le contre-colorant bleu.
Les applications incluent l’évaluation de la fibrose hépatique (stade METAVIR, score Ishak), la fibrose myocardique après infarctus, les maladies musculaires (les dystrophies montrent une augmentation du collagène endomysial) et la fibrose rénale (fibrose interstitielle et atrophie tubulaire). La coloration met également en évidence les membranes basales glomérulaires et aide à identifier la nécrose fibrinoïde dans les vaisseaux.
Verhoeff-van Gieson (VVG)
Le VVG colore les fibres élastiques en noir en utilisant la coloration élastique de Verhoeff (hématoxyline, chlorure ferrique et iode), suivie du contre-colorant van Gieson (fuchsine acide et acide picrique) qui colore le collagène en rouge et le muscle en jaune. Les fibres élastiques apparaissent comme des fibres noires, ondulées et ramifiées sur un fond rouge-jaune. Le VVG est utilisé pour évaluer les troubles des fibres élastiques : syndrome de Marfan (fragmentation et disruption des fibres élastiques aortiques), emphysème (perte des fibres élastiques alvéolaires) et artériosclérose (duplication et calcification de la lame élastique). En pathologie vasculaire, le VVG démontre les lames élastiques interne et externe, essentielles pour identifier l’invasion vasculaire par les tumeurs et classer les lésions artérielles.
Coloration de la Reticuline
Les colorations de la réticuline (Gordon and Sweet ou imprégnation argentique de Gomori) déposent de l’argent métallique sur les fibres de réticuline (collagène de type III), qui apparaissent noires sur un fond pâle. La réticuline forme la charpente de soutien des glandes, des vaisseaux sanguins et du muscle lisse. En pathologie hépatique, les colorations de la réticuline mettent en évidence l’architecture des plaques hépatiques — la perte de la charpente normale de réticuline indique une cirrhose ; l’expansion entre les plaques indique des nodules régénératifs. En pathologie médullaire, la coloration de la réticuline gradue la myélofibrose (MF-0 à MF-3). En pathologie tumorale, la réticuline délimite les structures alvéolaires et glandulaires, aidant à classer les tumeurs peu différenciées.
Hématoxyline Phosphotungstique (PTAH)
Le PTAH colore la fibrine, les striations transversales du muscle strié, les fibres gliales et les noyaux. Les striations musculaires et la fibrine apparaissent en bleu ; le collagène et le cartilage apparaissent en brun-rose. Le PTAH est utilisé pour diagnostiquer la nécrose fibrinoïde (vascularite), le rhabdomyosarcome (striations transversales) et la maladie d’Alzheimer (enchevêtrements neurofibrillaires et plaques séniles). La coloration nécessite une oxydation soigneuse (permanganate de potassium) et un mordançage, et elle est techniquement exigeante.
Immunohistochimie de l’Actine du Muscle Lisse
Bien qu’il ne s’agisse pas d’une coloration histochimique, l’IHC de l’actine du muscle lisse (SMA) a largement remplacé les colorations traditionnelles du tissu conjonctif pour identifier les cellules musculaires lisses et les myofibroblastes. La SMA colore le muscle lisse vasculaire, les péricytes et les cellules myoépithéliales. Elle est utilisée pour évaluer la différenciation tumorale (léiomyosarcome) et les proliférations myofibroblastiques.
Contrôle Qualité
Chaque coloration du tissu conjonctif nécessite un contrôle positif connu pour contenir le composant cible : peau ou côlon pour le trichrome (collagène), artère ou poumon pour le VVG (fibres élastiques), foie ou rate pour la réticuline, et muscle ou caillot de fibrine pour le PTAH. Les contrôles sont effectués avec chaque série. La sur-coloration et la sous-coloration sont évaluées en comparant l’intensité du contrôle avec les normes établies. Le dépannage des problèmes courants inclut l’ajustement du temps de différenciation (trichrome), de la concentration en chlorure ferrique (VVG) ou de la température de la solution d’argent (réticuline).
